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化学遗传激活rAAV-CaMK
企业认证
rAAV-CaMKIIa -DIO-hM3D(Gq)-mCherry
BrainVTA
详见说明
rAAV: Recombinant adeno-associated virus, 重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体,安全性高(目前还没有发现rAAV对人体致病),免疫原性低(感染后很少被免疫系统所清除),表达时间长。CaMKIIα:Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II,兴奋性神经元启动子。DIO:Double-floxed inverse Orientation, 是和Cre重组酶配合控制目的基因表达的元件。如果没有Cre重组酶的话目的基因不表达,在有Cre 的情况下目的基因才能开始表达。hM3D(Gq):hM3D(Gq)是从人毒蕈碱乙酰胆碱受体M3 上改造的仅对CNO(clozapine-N-oxide)有反应的人工受体(designer receptors exclusivelyactivated by designer drugs,DREADD),不再受乙酰胆碱激活。在一些神经元里,CNO 结合hM3D 后,激活Gq 蛋白偶联的磷酸酶PLCβ,引起PIP2被降解,从而使得被PIP2 关闭的KCNQ 外向钾离子通道被打开,以至于细胞膜去极化,形成动作电位,即激活神经元。在KCNQ 或是Gq 不表达的神经元里,hM3D 的功能可能会有所不同。mCherry:红色荧光蛋白,激发波长587nm,发射波长610nm。
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