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文献和实验对于试验成功与否至关重要。最关键的是,应使用专门配制、输送小分子 RNA 的转染试剂(大部分市售的转染试剂设计用于大型质粒 DNA,而不是小 RNA 分子)。此外,仅有部分试剂设计用于特定细胞系的转染,而多数试剂的特异性范围较广。Lipofectamine RNAiMAX 是专为将 siRNAs 高效转染真核细胞而设计的转染试剂。 8.使用一个适当的阳性对照来优化转染和检测条件 对于大部分细胞,管家基因适合作为阳性对照。向靶标细胞转染几个浓度的、对您所选择的阳性对照特异的 siRNA。(这也适用
元。 高效转染RNA——Lipofectamine® RNAiMAX 从最初的siRNA到如今的miRNA,随着小分子RNA研究的持续升温,研究人员也急需一种高效的RNA转染试剂。于是,Invitrogen推出了Lipofectamine® RNAiMAX转染试剂。它是一款RNAi特异的阳离子脂质体试剂,可以高效地将小分子RNA导入多种细胞类型。 Lipofectamine® RNAiMAX 转染试剂可以在10倍的浓度范围内获得最大的干扰效果以及极佳的细胞
于瞬时转染 仅 DNA 载体可用于稳定转染; RNA 本身无法稳定地导入细胞内 高拷贝的转染遗传物质可以实现高水平的蛋白质表达 单个或低拷贝数的稳定整合 DNA 可以实现较低水平的蛋白质表达 一般在转染 24–96 小时后收集细胞 需要 2–3 周筛选稳定转染的集落 一般不适用于采用诱导型启动子的载体研究 适用于采用诱导型启动子的载体研究 基因输送技术 细胞膜是由磷脂双分子层和镶嵌蛋白组成的,带有净负电荷。因此,它是大分子无法通过的障碍,如同样
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