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高效液相色谱法(HPLC)实验
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高效液相色谱法(HPLC)实验服务_高校科研检测服务机构
项
高效液相色谱法(HPLC)实验原理
高效液相色谱(HighPerformance Liquid Chromatography,HPLC)是药物分析最重要的仪器之一。它可以用于药物纯度检测、已知样品的定量分析、混合物的分离等。在药物处方前研究中,多采用HPLC进行样品纯度检测、稳定性测试和溶解度测试,是药物处方前研究重要的分析手段之一。
高效液相色谱仪(HPLC)用液体为流动相的色谱分离分析方法。它在经典色谱理论的基础上,采用了高压泵、化学键合固定相高效分离柱、高灵敏专用检测器等新实验技术建立的一种液相色谱分析法。高效液相色谱仪(HPLC)适于溶解后能制成溶液的样品,不受样品挥发性和热稳定性的限制,对分子量大、难气化、热稳定性差的生化样品及高分子和离子型样品均可检测。用途广泛,占有机物的80%。
高效液相色谱(HPLC)优点
1、高压:液相色谱以液体作为流动相(称为载液),液体流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。在现代液体色谱中供液压力和进样压力都很高,一般可达到15~30MPa,甚至可达MPa。
2、高速:高效液相色谱的流速较之经典液体色谱快得多,一般可达l—10mL/min, 个别可高达100mL/min以上,这已近似于气相色谱的流速。 高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于1h 。
3、高效:气相色谱的分离效能很高,高效液相色谱的柱效则更高,一般约可达 60000理论塔板/米;近来研究出许多新型固定相,使分离效率大大提高。
4、高灵敏度:紫外检测器的最小检测量可达毫微克数量级(10-9 g);荧光检测器的灵敏度可达10-11g。高效液相色谱的高灵敏度还表现在所需试样很少;微升数量级的样品就足以进行全分析。
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