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文献和实验,一组使用 NaHS 处理,一组则不作处理;然后用荧光马来酰亚胺染料 Alexa Fluor 488 C5 maleimide(下文简称MAL,Invitrogen,A10254)标记半胱氨酸上的硫醇基团,使正常的半胱氨酸通过 -S- 与 MAL 连接,而硫巯基化的半胱氨酸通过二硫键 -S-S- 与 MAL 连接,如下图: 图 1. 文献 Fig. 6G,硫巯基化分析步骤 接下来加入 DTT,硫巯基化蛋白上特有的二硫键就会被解开,导致荧光 MAL 分子脱落,荧光信号减弱。所以,荧光信号发生变化就验证
相关专题 蛋白纯化技术专题 DTT( 二硫苏糖醇)是实验室常用的还原试剂,常被用于蛋白质保存以及蛋白二硫键的还原。DTT的入特点是极易被氧化,稳定性较差,一般DTT常保存于-20度中可以长达数年。 DTT是一种很强的还原剂,其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。 DTT特点与DDT的保存 DTT是一种常用还原剂,有抗氧化作用,进口
绳索的原纤维,11股原纤维结合成微纤维,进而形成粗纤维,构成头发结构的基本元件。头发的α-角蛋白在湿热的条件下可以伸长成β-结构,冷却后又恢复原状。如在弯曲的头发中,加还原剂溶液使二硫键还原成半胱氨酸的巯基并加热破坏α-螺旋的氢键,可使头发伸直。假若过一段时间后除去还原剂而施以氧化剂,就可造成新的二硫键。经过洗发和冷却后,头发又形成α-螺旋并变成所要的弯曲发型,因为新的二硫键与原来的位置不同。这就是烫发的基本原理。
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