进口PCR板封膜超薄透明，可用于荧光定量qPCR

99% 的人不知道的 PCR 耗材小机密！

和鉴别，特别是在高通量实验中。尽管塑料的颜色对 DNA 扩增没有影响，但在设置实时荧光定量 PCR 的反应时，与透明耗材相比，我们更推荐使用白色塑料耗材或者经磨砂处理的塑料耗材，以实现灵敏和准确的荧光检测。 qPCR 使用透明和白色耗材的结果比较（A）与透明孔相比，白色孔 Ct 值更低（灵敏度更高）。（B）白色孔在技术重复中也表现出更高的一致性。 白色耗材通过阻止荧光折射出管来提高 qPCR 数据的灵敏度和一致性。折射被最小化时，更多的信号被反射回检测器，从而增加信噪比。此外，白色管壁可阻止荧

定量实验做了千千万，这些细节你注意到了吗？

或者基因特异性引物。荧光定量荧光定量主要从定量方法的选择、引物设计原则、ROX 的选择、反应体系的配置和反应条件的设置等分别进行阐述：定量方法的选择：定量方法分为相对定量和绝对定量。相对定量可用于检测某种处理方法对基因表达的影响，检测基因在不同时间的表达差异和比较基因在不同组织中的表达差异；绝对定量可对病毒中核酸的量进行检测等。大家在做实验时，一定要根据自己的实验选择合适的定量方法。引物设计原则：qPCR 引物设计的好坏，直接关乎着扩增效率高低，产物特异性与否。所以正确设计出好的引物是 qPCR 成功

qPCR常见问题及其分析

PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束