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- 百奥莱博
- JN0070-FKB
- 北京
- 2025年07月16日
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- 技术资料
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456
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
150U×5
特别提示：包括Klenow大片段在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Klenow大片段
产品货号：JN0070
产品规格：150U×5
本酶是大肠杆菌DNA聚合酶I经基因工程改造的产物。由于基因重组，其不含有DNA聚合酶I的5´→3´外切核酸酶活性，只具有5´→3´的DNA聚合酶活性和3´→5´的外切核酸酶活性。其中3´→5´的外切核酸酶 的活性较弱，不适用于3´突出端的切平。本品浓度为5U/ul。
产品用途：
1、双脱氧法DNA序列测定。 (Sanger法)
2、突出端的补平。（参见实验方案）
3、使用随机引物进行DNA标记。
活性定义：
在37℃条件下，30分钟内能使10 nmol 的dNTPs渗入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
热失活：75℃，20分钟。
我公司销售的Klenow大片段北京价格，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验随机引物法探针标记 随机引物法的原理是使被称为随机引物(random primer)的长6个核苷酸的寡核苷酸片段与单链DNA或变性的双链DNA随机互补结合(退火)，以提供3， 羟基端，在无5， →3， 外切酶活性的DNA聚合酶大片段(如Klenow片段)作用下，在引物的3， 羟基末端逐个加上核苷酸直至下一个引物。当反应液中含有标记的核苷酸时，即形成标记的DNA探针。6个核苷酸混合物出现所有可能结合序列，引物与模板的结合以一种随机的方式发生，标记均匀跨越DNA全长。当以RNA
一、Lighteningssembly Cloning Kit 传统克隆方法：引物设计合成、PCR、连入克隆载体、酶切获得插入片段，酶切获得线性载体，连接获得重组质粒。需酶切，引物设计受酶切位点限制；需连入克隆载体；步骤多，耗时长；效率低。 北京康碧泉公司代理的Gene-Foci试剂盒的克隆方法：引物设计合成、PCR获得插入片段，PCR或酶切获得线性载体，连接获得重组质粒。无需酶切，引物设计不受酶切位点限制；无需连入克隆载体；步骤少，速度快；高连接效率，高
一、DNA聚合酶或Klenow大片段介导的原位缺口平移（ISNT） 1．切片常规脱蜡，梯度乙醇复水化。 2．将切片组织浸入2×SSC液中，80℃，20min，然后蒸馏水冲尽。 3．0.5％胃蛋白酶（pH2.0）37℃消化0～20min，PBS洗尽。 4．用滤纸擦干组织块周边液体放入湿盒组织切片上滴加缓冲液A，5min。缓冲液A：50mmol/L Tris-HCl, 5mmol/L MgCl2, 10mmol/L β-巯基乙醇，0.005％BSA，pH7.5。 5．弃
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