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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
160
- 英文名:
DNA Nested Deletion Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
- 规格:
10次
特别提示:包括DNA嵌套缺失试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DNA嵌套缺失试剂盒
英文名称:DNA Nested Deletion Kit
产品货号:BTN100213
产品规格:10次
本产品是在Henikoff方法的基础上改良而得。最常见的DNA嵌套缺失方法是利用ExoⅢ等外切酶从线状DNA的一端连续切除核酸,最后环化得到可以转化的质粒。该方法最早由Henikoff在Putney的方法的基础上发明,其流程图如下:
产品特点:
1.不需要使用超螺旋的质粒和任何限制性内切酶,非常皮实。
2.一站式,用户只需要提供质粒,不需要单独准备其他试剂。
3.一管式,不需要任何纯化和回收的处理。
4.提供阳性对照质粒,便于在遇到困难时分析原因。
5.得到的片段可以用于侧序和蛋白结合位点的分析等试验。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| DNA聚合Buffer | 1mL |
| DNA酶切Buffer | 1mL |
| 酶切终止Buffer | 1mL |
| DNA连接Buffer | 1mL |
| T4 DNA聚合酶 | 10μL |
| T4 DNA Ligase | 10μL |
| Exo Ⅲ | 10μL |
| S1核酸酶 | 10μL |
| 对照模板质粒 | 10μg |
| 超纯水 | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用效果:
将5μg变性的质粒DNA与特异的引物混合,用T4 DNA聚合酶进行全长合成,然后用ExoⅢ酶切,在不同时间点取样,得到单向酶切产物,然后用绿豆核酸酶去掉单链DNA,最后用DNA连接酶将DNA自身环化,最后转化细菌。
图注:用本产品处理含有2.5 KB插入片段的质粒,两边为1Kb DNA marker。中间6条带从左到右分别为ExoⅢ处理0、1、2、3、4和5分钟的DNA(S1核酸酶处理后才上样电泳)
我公司销售的DNA嵌套缺失试剂盒优惠促销,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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德国IBL国际有限公司是一家有着近30年经验的专业医疗诊断试剂研发制造商,其产品均已经通过ISO9001、ISO13485和欧洲CE认证,并且通过了美国FDA的认证。公司产品系列包括生物胺系列、传染病系列、新生儿筛查系列及不孕系列等ELISA产品及放免产品。深圳市科润达生物工程有限公司,为德国IBL公司中国(含港澳地区)独家代理商!现我公司推出德国IBL儿茶酚胺/生物胺类检测试剂优惠大促销活动,即日起,通过深圳科润达生物购买德国IBL儿茶酚胺/生物胺类产品,即可获得5~7.5折优惠! 活动时间
和时间)有助于提高得率和纯度,减少残留对后继实验的影响(这个方法要注意不是所有试剂盒都可以使用,因为有些试剂盒的纯化柱填料松一些,离心有时可能导致少量填料脱落,而Qiagen的这个产品是膜式的,结合非常牢固,中大有人用这个柱子高温消毒后重复使用,效果不赖,可见皮实。当然这是厂家绝对不推荐的)。 其他的技巧也是大家熟知的,比如切胶的时候要尽量减少切胶体积(不超过400mg),由于Qiaquick柱子的载量达到10ug,如果胶块实在太大而预期DNA 总量不超过10ug,可以用大一点的管溶解,分几次上柱
(MMLV)反转录酶或选择嗜热DNA聚合酶可能在高温(60℃ -70℃)有效地逆转录mRNA,从而消除了5'端由于高CC含量导致的mRNA 二级结构对逆转录的影响;改进之四是采用热启动PCR (hot start PCR)技术和降落PCR(touch down PCR)提高PCR反应的特异性。 随着RACE技术日益完善,目前己有商业化RACE技术产品推出,如CLONTECH的MarathoTM技术和SMARTTM RACE技术。邢桂春等(2001)先后使用上述两种试剂盒进行RACE反应,结果发现使用
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