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- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
36
- 生长状态:
贴壁细胞
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 英文名:
DC2.4
中文名称:小鼠树突状细胞
简称:DC2.4
细胞培养条件:RPMI-1640+10% FBS
生长特性:□ 贴壁 □悬浮 □半悬浮半贴壁
形态:上皮细胞样
来源:Millipore
是否通过STR鉴定:□是
背景资料:
本产品仅供科研!
DC2.4小鼠树突状细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验一、方法 根据1999年lutz的方法,做了一些改进,培养DC很多人用的是高浓度的细胞,高浓度的因子,但是这样产量不高,我每一次分离一只小鼠的骨髓,大约可以得到107个细胞,分成10盘,每盘10 ml培养基,用低浓度的细胞因子,这样可以大大提高产量,每次能培养得到1*107个DC左右,流式细胞术检测:细胞纯度应该大于90%,这个方法还是很好用的。 二、具体步骤 1. C57Bl/6小鼠 2. 处死小鼠,75%酒精浸泡10 min。 3. 解剖取出小鼠
养BMDC有好几个月了,看了2、3篇文献就开搞,发现论坛里还是有一些战友养这个。就想开个专题讨论贴,请新手老手都上来谈谈经验或者问些问题。集思广益,大家相互促进下。 我在论坛里看到因为有战友养DC看百把篇文献的,感到佩服又奇怪,就BMDC的培养我目前只知道有个经典版本和改良版本。 我用的是改良版本,参考文献改天附上(可能养这个的战友大多看过了)。 1. 取小鼠股骨胫骨,小鼠要年轻!(6W-8W,以前用只一年左右的养出来外形也张牙舞爪,但流式检测没有CD11c表达,很奇怪
树突状细胞( DC )的分布及亚群 1.根据组织分布特点区分不同的DC DC数量极少,不足人外周血单个核细胞的l%,在小鼠脾细胞中也只有0.2%~0.5%,但却在人体中广泛分布于脑以外的全身各脏器。不同部位的DC有不同的命名。 ①并指状DC(interdigitatingDC,IDC)又称交错树突状细胞,分布于次级淋巴组织和胸腺髓质中的T细胞区。 ②滤泡DC(follicularDC,FDC)主要分布于淋巴
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