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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
66
- 英文名:
Calf intestinal alkaline phosphatase (CIP)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
5KU|1KU|500U
特别提示:包括小牛肠碱性磷酸酶(CIP)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:小牛肠碱性磷酸酶(CIP)
英文名称:Calf intestinal alkaline phosphatase (CIP)
产品货号:SV1060
产品规格:5KU|1KU|500U
特性:
克隆载体去磷酸化,防止载体自连
T4 多聚核苷酸激酶标记 DNA 末端前的去磷酸化
测序或 SNP 分析前 PCR 反应中 dNTP的处理
DNA 和 RNA 的去磷酸化
概述:
小牛肠碱性磷酸酶(CIP)催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。CIP 在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。CIP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。
来源:
小牛肠粘膜。
反应条件:
1X 反应缓冲液
[50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml BSA (pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。
质保声明:
小牛肠碱性磷酸酶(CIP)经过严格的质控检测,确保该产品具有zuì高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位指在 1 ml 反应体系中,37℃ 条件下,1 分钟催化 1 μmol 的对硝jī苯磷酸盐(PNPP)水解成对硝jī苯fēn所需的酶量。
浓度:
10,000 units/ml。
我公司销售的小牛肠碱性磷酸酶(CIP)现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验oryzae)中分离的高度单链特异的外切酶。 活性:可以降解单链DNA或RNA或双链的单链区。 其主要用途有: ⑴ 在cDNA合成过程中,切开cDNA的发夹末端; ⑵ 载体构建过程中,切去DNA片段的单链尾巴, 形成平末端结构。 (三)碱性磷酸酶 从大肠杆菌中分离的细菌碱性磷酸酶(Bacterial Alkaline Phosphatase)简称BAP。 从小牛肠中分离的叫小牛肠碱性磷酸酶( Calf
片段单酶切后,在 DNA 片段两端是互补的粘端。DNA 片段插入载体时具有正反两个方向。③平齐末端连接需要在 DNA5'-端去磷酸化,否则线性载体 DNA 分子将发生自身环化连接。(一)5'-端去磷酸化反应通常只对载体 DNA 分子进行 5'-端去磷酸化反应就基本可以避免自身环化连接。【实验试剂与器材】1. 小牛肠磷酸酶 (Calf intestine phosphatase ,CIP)2. 10×CIP 缓冲液【实验方法与步骤】1. 酶切 DNA 反应,在 75 ℃ 加热 15 min 灭活
的内切酶线性化可得到不同的转化子。如对载体pPC19选用BgiⅡ线性化,转化后可得到Muts表型转化子;选用SaI或StuI线性化,转化后可得到Mut+表型转化子。为了防止载体质粒DNA的自身环化,用小牛肠碱性磷酸酶(CIP)处理酶切后的质粒DNA,具体操作如下:(1)建立反应体系:线性化的质粒 35ul10x CIP buffer 4ulCIP 1ulddH
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