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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
588
- 英文名:
Karvovsky Fixative Solution
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输、4℃保存,保存期为1年。使用方法:1.对动物,最好先灌注固定,然后再浸泡固定10-30分钟。对植物、真菌、细菌、病毒、原虫等材料,直接采用浸泡法固定。浸泡在Karnovsky 固定液中的材料可以在4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")Karnovsky固定液报价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:Karnovsky固定液报价
编号:BTN131226
规格:250mL
英文名:Karvovsky Fixative Solution
品牌:百奥莱博
产地:北京
Karnovsky固定液是组织化学中最常用的混合型固定液之一,主要成分含能快速渗透的多聚甲醛和缓慢渗透的戊二醛。它能很好保存组织的抗原性和精细结构,故尤其适用于电镜免疫化学样品的固定。本产品是在Karnovsky原始配方的基础上修改而得。
产品特点:
1.既可用于灌注法固定,也可用于浸泡法固定。
2.渗透能力强,固定均匀,组织收缩小,染色效果好。
3.适用范围广,可以用于固定从细菌、真菌,植物到动物的各种生物材料。
4.对原始配方进行了改良,不使用有毒的含砷化合物,减少了对操作者的毒害。
5.固定的组织经过包埋切片等处理用既可用于光学显微镜检测,也可用于电子显微镜检测。
储存条件:低温运输、4℃保存,保存期为1年。
使用方法:
1.对动物,最好先灌注固定,然后再浸泡固定10-30分钟。对植物、真菌、细菌、病毒、原虫等材料,直接采用浸泡法固定。浸泡在Karnovsky 固定液中的材料可以在4℃放置5年。
2.固定后的组织洗涤后即可用于包埋、切片、染色、检测等后续操作。
关于Karnovsky固定液报价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·戊二醛磷酸缓冲固定液
编号:BTN131278
英文名称:Glutaraldehyde Fixative Solution
规格:250mL
本产品为2.5%戊二醛磷酸缓冲固定液,戊二醛为五碳醛,氧气、高温、中性和碱性pH均可使戊二醛失去醛基,产生聚合。戊二醛作为固定液的优点是对组织细胞的细微结构保存较好,不足之处是渗透慢。本产品固定时间通常为15分钟~4小时,不宜过长。
储存条件:常温运输、4℃保存,保存期半年。
·Ribo-SPIA cDNA扩增试剂盒
编号:BTN131083
英文名称:Ribo-SPIA RNA Amplification Kit
规格:20次
血液样品和各种临床样品(包括组织检查、FFPE切片或少量细胞样品)都是基因表达分析和诊断的常见材料,但这些样品通常数量有限,质量不高,还没法进行第二次取样。所以得到足够RNA量供后续试验是一个非常棘手的瓶颈。为解决这一问题,本公司根据Ribo-SPIA技术,开发了本产品。Ribo-SPIA技术的核心是利用DNA/RNA嵌合引物,以带polyA尾巴的mRNA为模板进行逆转录并得到双链cDNA、RNase H不间断地在cDNA第1链中的RNA部分产生裂口,DNA聚合酶以此裂口为基础进行链取代聚合反应,产生cDNA单链。
产品特点:
1.高效,能线性扩增1000-10000倍,能用5-100 ng总RNA模板扩增得到5μg左右的单链cDNA(扩增的cDNA主要来源于总RNA中的mRNA)。
2. 步骤简单方便,扩增在恒温进行,只需要4个小时,不需要特殊仪器设备。
3. 保真性好,保持RNA样品中各分子的相对丰度。
4. 尤其适用于RNA产量和质量都不高的样品。
5.扩增得到的单链cDNA能直接用于各种后续试验,包括qPCR、芯片分析、杂交反应等。
6. 本产品足够做10次双链cDNA的合成,20次SPIA扩增。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| cDNA一链合成缓冲液 | 40μl |
| MMLV逆转录酶 | 10μl |
| cDNA二链合成缓冲液,5× | 160μl |
| cDNA二链合成酶混合液20× | 40μl |
| SPIA RT引物 | 40μl |
| SPIA反应液,5× | 320μl |
| SPIA扩增引物 | 320μl |
| SPIA酶混合液 | 120μl |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期为1年。
使用方法:
一:样品RNA的制备
本产品不含RNA相关试剂,用于Ribo-SPIA扩增的每个批次的RNA样品最好先做一个预实验。总RNA样品的浓度必须在1-20ng/μL,一次RIBO-SPIA所需总RNA的量为1ug。也可以使用mRNA,一次Ribo-SPIA所需总mRNA的量为5-100 ng。过低则需要浓缩,过高则需要用无RNase的水稀释。RNA必须经过DNase处理,不能含DNA污染。微量提取时不能使用核酸类的助沉剂。注意:本产品只能扩增含带polyA尾巴的RNA,不能扩增DNA和不含polyA尾巴的RNA。
二:一管式双链cDNA的合成
1.在0.5mL PCR管中,按下表配制双链cDNA合成反应。
注意:最好每次实验设置一个阴性对照组,在此对照中用超纯水替代自备的mRNA或总RNA:
| 成分 | 用量 |
| 自备mRNA或总RNA | 4μL mRNA(5-100ng)或4μL总RNA(1ug) |
| SPIA RT引物MTA3 20uM | 1μl |
| 65℃,5分钟后室温放置2分钟,短暂离心后放4℃ | |
| cDNA一链合成缓冲液 | 4μl |
| MMLV逆转录酶 | 1μl |
| 轻柔吹打混匀后得到10μL的反应体系。42℃保温90分钟合成第一链cDNA。结束后70℃保温15分使酶变性,最后4℃放置,然后加入下列成分,得到80μL反应体系。 | |
| 超纯水 | 50μl |
| cDNA二链合成缓冲液 | 16μl |
| cDNA二链合成酶混合液 | 4μl |
| 轻柔吹打混匀后,短暂离心,16℃保温2小时合成cDNA第二链,然后75℃ 15分灭活酶,最后4℃放置待用 | |
三:SPIA扩增
2.在0.5mL PCR管中,按下表配制20μL的SPIA反应体系。注意:最好设置两个阴性对照组,在此两个对照中分别用超纯水替代SPIA引物和cDNA双链反应液。
| 成分 | 用量 |
| cDNA双链反应产物 | 40μL(来于上步) |
| SPIA扩增引物10uM | 16μl |
| SPIA反应液,5× | 16μl |
| 超纯水 | 42μl |
| 94℃20秒后50℃放置复性待用 | |
| SPIA酶混合液 | 6μl |
| 轻柔吹打混匀后得到120μL反应体系,50℃扩增60分钟,最后4℃放置 | |
四:SPIA扩增产物的检测
3. 取5μL SPIA扩增产物进行PAGE电泳检测。标准的反应结果是产生长度在200-2000bp之间的产物。
4. 如果产物将用于PCR定量,则可以不经过纯化直接使用,如果需要用于芯片杂交和浓度测定,则需要按常规的方法纯化cDNA以便去除残留的dNTP和引物。
5. OD检测纯度和浓度。在OD260的波长下测样品你给的光吸收。由于扩增产物是单链DNA,故1OD260=33ug/mL。
6. 所得DNA可以放-20℃长期放置。
Karnovsky固定液报价关键词:Karvovsky Fixative Solution,BTN131226,Karnovsky固定液
SNM299 脑脊液蛋白测试盒(磺基水杨酸法) CSF protein Assay Kit
GL0429 **(代"胺")蓝染色液 100ml
GL1567 Mg-ATP溶液(10mmol/L,pH7.4) 100ml
SNM415 细胞核蛋白提取试剂盒 Nuclear protein extraction kit
SNM098 线粒体呼吸链复合物V试剂盒(F0F1-ATP酶/ATP合成酶) Electron transport chain Complex V assay kit
GL0154 SOC固体培养基粉剂 1L
GL1312 Lezol(总RNA提取试剂) 50ml|100ml
GL0917 亮绿染色液(2%) 100ml
GL1986 甘油三酯(TG)检测试剂盒(GPO-PAP双试剂比色法) 100T
SK169 α-半乳糖苷酶检测试剂盒 α-GAL Test Kit
GL1075 抗荧光淬灭封片剂 5ml|10ml
GL0644 黏蛋白染色液(温和甲基化法) 2×50ml
GL1751 乙酸*溶液(3mol/L,pH5.2) 100ml|500ml
SNM557 DMEM高糖培养基(含L谷*酰胺,含丙*(代"酮")酸*,含HEPES) DMEM high glucose medium
Karnovsky固定液报价关键词:Karvovsky Fixative Solution,BTN131226,Karnovsky固定液
·dCTP溶液(2.5mM)
编号:BTN130915
英文名称:dCTP Solution(2.5mM)
规格:2mL
dCTP分子式为C9H13N3O13P3Na3,分子量是533.1,消光系数为9.1×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为271nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·百万碱基级真菌DNA提取试剂盒
编号:BTN130942
英文名称:Fungus DNA extraction kit(millions of base)
规格:10次
dCTP分子式为C9H13N3O13P3Na3,分子量是533.1,消光系数为9.1×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为271nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒
编号:BTN121205
英文名称:Cell Counting Kit-8
规格:5mL
本CCK-8试剂盒是基于WTS-8的第二代细胞增殖及毒性检测产品,主要成分为水溶性四唑盐WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝*基)-3-(4-硝*基)-5-(2,4-二磺基*)-2H-四唑单*盐,WST-8为一种MTT类似物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成橙黄色水溶性的甲臜(formazan)。生成的甲臜量与活细胞数量成线性相关。
产品特点:
1.溶液稳定,对细胞无毒性,可直接同步加入到细胞样品中长时间孵育,可以多次测定选取最佳测定时间。
2.灵敏度高,实验的灵敏度比其它如MTT,XTT或MTS高,操作简便、快捷,实验结果重复性好。
3.水溶性,免去后续的溶解步骤。
4.不需要换液,尤其适合于悬浮细胞。
5.安全无毒,不会对操作人员身体造成危害。
6.可以广泛应用于生物活性因子的活性检测、药物的筛选、细胞增殖检测、细胞毒性。
储存条件:常温运输和4 ℃干燥避光保存,有效期一年。
使用方法:
一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时测定细胞具体数量时)
1.先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2.按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3.接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加 CCK 试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间)。
二、细胞活性检测
1.在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板在培养箱中预培养24小时(37℃,5% CO2)。
2.每孔加入10μL的CCK溶液。
3.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5.如果暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者 1%w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增殖-毒性检测
1.在96孔板中配置 100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5%CO2)。
2.向培养板中加入10μL不同浓度的待测物质。
3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
4.向每孔加入10μL CCK溶液。
5.将培养板在培养箱内孵育 1-4小时。
6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
7.如果暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者1%w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
注意事项:
1.如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。如果药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
2.用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡,否则会干扰测定。
3.建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。
4.有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,会干扰OD 值读数。
5.白细胞可能需要培养较长时间。
6.当使用标准 96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1000个/孔(100μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2500个/孔(100μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液。
7.如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度最高。
8.培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
结果分析:
细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)]×100
A(加药):具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0加药):具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
*细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
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文献和实验,换用新吸头加入洗脱缓冲液,充分混匀,结合的核酸即与磁珠分离,从而得到纯化的核酸。 2. 磁棒法 磁棒法是通过固定液体,转移磁珠来实现核酸的分离,原理和过程与抽吸法的一样,不同的是磁珠和液体分离的方式。磁棒法是通过磁棒对磁珠的吸附将磁珠从废液中分离开,放入下一步的液体中,实现核酸的提取。 磁珠法核酸提取仪的特点: 1. 能够实现自动化、高通量操作。 2. 操作简单、快速。 3. 安全环保。 4. 高纯度,高得率。 5. 无污染,且结果稳定。 6. 成本低廉,便于广泛
0.01 mol/L的过碘酸盐、0.075 mol/L的赖氨酸、2%的多聚甲醛及0.037 mol/L的磷酸缓冲液。 6、Karnovsky's液(pH7.3) 试剂:多聚甲醛 30 g 25%戊二醛 80 ml 0.1 mol/L PB 至1000 ml 配制方法:先将多聚甲醛溶于0.1 mol/L PB中,再加入戊二醛,最后加0.1 mol/L的PB至1000 ml,混匀。 该固定剂适于电镜免疫细胞化学,用该固定液在4 ℃短时固定,比在较低浓度的戊二醛中长
。它们最初只是光学显微镜通用的固定液,但在免疫细胞化学上用其它方法不成功时,也可试用。总之,掌握一个原则,免疫细胞化学中,含重金属的固定液禁用(但Zenker-Formalin可进行短时的固定)。目前多数认为,对生物标本较好的固定措施是:用4℃的Karnovsky’s液灌注固定10~30min后,接着在pH7.3、0.1mol/L的二甲胂酸钠缓冲液中漂洗过液,这种短时冷固定处理,有助于超微结构和许多肽类抗原的保存。对其它较难保存的抗原可尝试PFG、PLP及Zamboni's液等混合固定液。二、缓冲
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