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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
332
- 英文名:
SpeI Restriction Endonuclease
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
2500U|2500U|500U|250U
特别提示:包括SpeI限制性内切酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:SpeI限制性内切酶
英文名称:SpeI Restriction Endonuclease
产品货号:SV0710
产品规格:2500U|2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 75%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
该酶切割产生一个 5´ CTAG的突出端,能有效地和 Avrll、Nhel 或 Xbal 切割产生的 DNA 片段连接。
我公司销售的SpeI限制性内切酶北京现货,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验经过电泳回收的PCR产物直接酶切的效果往往不佳。这主要是因为酶切位点太靠近片段两侧,缺乏足够多的保护碱基。要克服这一问题,要么在最初引物设计时加上较多的保护碱基,要么用过量的限制内切酶长时间消化。而后者的效果并非特别理想。我们尝试首先将PCR产物互相平连,再以过量限制性内切酶长时间消化,得到了较好的效果。这种方案的潜在危险在于当酶切仍不完全时最后得到的片段两端很可能带有同一种酶的识别序列,从大小上无法区分。 一、直接消化的方案 VHPCR产物 1μg
实验试剂 高保真聚合酶(pfu ultra),限制性内切酶(XhoI、SpeI、BamHI、SpeI、SacI),金粉,无水乙醇,2.5MCaCl2 ,20ul 0.1M亚精胺 实验设备 PCR扩增仪,PDS-1000/He型基因枪,激光共聚焦显微镜(Carl Zeiss LSM 510 ) 实验材料 洋葱 实验
和耐药性相关突变。 3.4 DNA 甲基化常用检测方法 近年来涌现出很多 DNA 甲基化的检测技术,目前依据对目标 DNA 的预处理手段可将甲基化检测技术分为 3 类: 3.4.1 基于限制性酶切预处理的甲基化检测技术 这种方法是利用甲基化敏感性限制性内切酶对甲基化区域不切割的特性,将 DNA 消化为不同大小的片段后再进行分析。常用的经典酶对是 Hpa II - Msp I(识别序列 CCGG )。随后进行 Southern 或 PCR 扩增分离产物,以明确目标片段的甲基
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