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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
Endonuclease SpeI
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃
- 规格:
2000U/1000U
| 规格: | 2000U | 产品价格: | ¥540 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1000U | 产品价格: | ¥280 |
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文献和实验) 水 2μl 总体积30μl,23℃过夜连接,65℃灭活10min,用无水乙醇沉淀后溶解于适量的TE中。此时若取约100ngDNA电泳,应当见到在390bp左右DNA条带已基本消失,代之的是从二聚到多聚体DNA条带。 3. 内切酶消化: VHPCR平连产物 1μg (B.M.)10×H缓冲液 15μl XhoI100U SpeI50U, 加超纯水补足至150μl,37℃消化20h,65℃灭活10min。直接
实验试剂 高保真聚合酶(pfu ultra),限制性内切酶(XhoI、SpeI、BamHI、SpeI、SacI),金粉,无水乙醇,2.5MCaCl2 ,20ul 0.1M亚精胺 实验设备 PCR扩增仪,PDS-1000/He型基因枪,激光共聚焦显微镜(Carl Zeiss LSM 510 ) 实验材料 洋葱 实验
,GenbankDatabase。由于抗体基因编码FR区的部分比编码CDR区的部分要保守,因此可以将引物设计为FR区的互补序列。 针对抗体不同亚族其FR区序列也不尽相同的特点,本室设计了一组引物以确保不会漏掉某一亚族。选择与FR1区段互补的序列作为5’端引物,选择与FR4互补的序列作为3’端引物。扩增的产物是VH或VL基因。为了便于基因克隆,还在引物外侧加上了合适的酶切位点,重链是XhoI-SpeI,轻链是XbaI-EcoRI。 这些酶所识别的序列经计算机检索,证明很少或几乎不在抗体可变区基因
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