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SILAC定量蛋白组分析-蛋白
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SILAC定量蛋白组分析-蛋白组定量分析-科研服务专业机构
项
SILAC是细胞培养条件下稳定同位素标记技术(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture, SILAC)的简称。
SILAC实验流程:细胞培养基中加入轻、中或重型稳定同位素标记的必需氨基酸赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg),在细胞生长过程中使新合成的蛋白会带上稳定同位素标签。等量混合各类型蛋白质,酶解后进行质谱分析。通过比较一级质谱图中不带标记/带同位素标记质谱峰型的面积大小进行相对定量,同时二级谱图对肽段进行序列测定从而进行蛋白鉴定。
与SILAC类似,二甲基Dimethyl标记也是一种同位素蛋白标记的方法。Dimethyl是一种小分子同位素化学标记物,通过化学标记的方法标记细胞裂解后的蛋白或多肽的N端或者赖氨酸的ε氨基基团,使蛋白/多肽标记上不同的Dimethyl标签。除了标记方法的差别外,SILAC/Dimethyl两种标记的质谱分析方法基本一致,而且具有相近的分析精度和广度,在定量蛋白组学分析研究中受到越来越广泛的运用。
技术特点:
体内标记技术,标记效率高;
活体标记,更接近样品真实状态;
定量精确,线性范围广,定量重复性好;
与化学标记相比,样本量要求少;
可在对多种培养基中的多种细胞进行标记。
关于样品:
1.使用干冰将冻存细胞寄给我们即可,同时保证细胞具有可以传代培养5次以上的能力;
2.如果您需要自己标记细胞并完成细胞的刺激等处理过程,您只需要将标记完成并且经过处理的细胞样品或者蛋白样品干冰寄给我们即可;对于每个样品,需要保证含有50-100ug蛋白。
青岛菲优特检测有限公司拥有中国合格评定国家认可委员会(CANS)认可实验室3000余平米,设有分析理化分析室、分子生物学室、细胞室等十多个专业实验功能间。配备液相色谱质谱联用仪(LC-MS)、气相色谱质谱联用仪(GC-MS)、电感耦合等离子体发射质谱仪(ICP-MS)、生物分子相互作用仪等250余台(套)、设备资产2700多万元高端理化和生化检测分析仪器和设备。菲优特检测现有硕士以上学历专职技术人员30余名,专业涵盖生物学、遗传学、药物化学、分析化学及水产学等相关专业,并且配备各个领域技术专家进行技术指导与支撑。
青岛菲优特检测有限公司以科学研究为首任,以客户为中心,在严格的程序下开展检测工作,为客户提供专业科学的检验检测、研发分析服务。
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