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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
104
- 英文名:
DNA Polymerase I
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
500U|5000U
特别提示:包括DNA聚合酶I在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DNA聚合酶I
英文名称:DNA Polymerase I
产品货号:WH0162
产品规格:500U|5000U
DNA Polymerase I在模板和引物(DNA或RNA)存在的条件下,以dNTP作底物,沿5"-3"方向催化与模板互补DNA的合成。同时本酶还具有5"-3"外切核酸酶活性以及3"-5"外切核酸酶的活性。另外,本酶可催化切刻平移反应。本产品来源于含有PolA基因的大肠杆菌重组菌株。分子量大小约为103.1kDa。本制品浓度为10U/μl。
产品特点:
·可催化切刻平移反应;
·酶比活性高,稳定性好,与其他酶兼容能力强。
产品组成:
| 组分 | WH0162-1 | WH0162-2 |
| DNA Polymerase Ⅰ | 500U | 5000U |
| 10×Buffer | 500μl | 1.5ml |
储存条件:-25℃~-15℃保存。
贮存液成分:25mM Tris-HCl,0.1mM EDTA,1mM DTT,50%甘油
适用范围:
1.在二代测序(NGS)应用中,主要用于mRNA测序文库构建过程中cDNA第二链的合成。
2.与DNase I或者RNase H一起使用,进行切刻平移反应。
单位定义:1单位活力定义为在37℃、30min内,将10nmol dNTP掺入到酸不溶物质中所需的酶量。
质量控制:
| 性质 | 描述 |
| 蛋白纯度 | >99% |
| 酶活性 | 6,850U/mg |
| 单链外切酶活性 | 200U酶中,有活性 |
| 双链外切酶活性 | 200U酶中,有活性 |
| 双链内切酶活性 | 200U酶中,未检出 |
| 宿主基因组污染 | 200U酶中,<10个拷贝 |
使用方法:
在NGS文库构建过程中,一般按终浓度0.3U/μl的量加入DNA聚合酶I。也可根据实验具体情况来调整用量。
反应条件:16℃,120min。
反应结束以后,后续一般会进行产物纯化操作。
我公司销售的DNA聚合酶I(>99%)现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验与DNA损伤修复有关。 3.DNA聚合酶Ⅲ(DNA polⅢ) 这是在DNA复制过程中起主要作用的聚合酶,它是由一个多亚基组成的蛋白质分子,其分子量>600kDa整个酶分子形成一个不对称的二聚体,每个大肠杆菌细胞中只有10?0个酶分子,但催化dNTP参入DNA链的速率却是最快的,约为9000核苷酸/每分钟/每个酶分子。这也证明DNa polⅢ是DNA复制过程中主要发挥作用的酶。在大肠杆菌染色体DNA进行复制时,DNA聚合酶Ⅲ全酶并不是单独起作用的,而是与引发体,介链酶等构成一个复制
vol 687 Chapter 2 采用DNA聚合酶融合技术进行长片段PCR扩增 (精华)
. Acad. Sci. USA 99,596–601. 8. Greagg, M.A., Fogg, M.J., Panayotou, G.,Evans, S.J., Connolly, B.A., and Pearl, L.H. (1999) A read-ahead function in archaeal DNA polymerases detects promutagenic template-strand uracil. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96
缺口平移法探针标记 探针的标记方法很多,大致可以分为两大类:引入法和化学修饰法。引入法是运用标记好的核苷酸来合成探针,即先将标记物与核苷酸结合,然后通过DNA聚合酶、RNA聚合酶及末端转移酶等将标记的核苷酸整合入DNA或RNA探针序列中去。化学修饰法即采用化学方法将标记物掺入已合成的探针分子中去,或改变探针原有的结构,使之产生特定的化学基团。引人法较化学修饰法更常用.按其整合的方法不同?引入法可分为缺口平移法、随机引物法、末端标记法和PCR扩增标记法和RNA体外转录法等。 缺口
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