ScibenECL Plus超敏化学发光试剂盒

ScibenECL Plus超敏化学发光试剂盒

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  • ¥250 - 1600
  • SCIBEN
  • MR1004
  • 国产
  • 2025年07月16日
    • 详细信息
    • 询价记录
    • 技术资料
    • 库存

      现货

    • 英文名

      ECL Plus

    • 保质期

      一年以上

    • 供应商

      南京善本

    • 保存条件

      4 ℃密封避光保存

    • 规格

      50 ml/100 ml/500 ml

    规格:50 ml产品价格:¥250.0
    规格:100 ml产品价格:¥420.0
    规格:500 ml产品价格:¥1600.0
    ScibenECL Plus超敏化学发光试剂盒

    一、产品描述
    善本生物ScibenECL Plus超敏化学发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶(HRP)的抗体及其关联的抗原。ScibenECL Plus采用了独特的增强发光底物系统,具有曝光背景低,稳定性以及灵敏度高的特性和优势:
    1. 可使用更高的抗体稀释倍数,极其节省抗体;
    2. 0.11 μg/ml一抗(以1 mg/ml储存液稀释1:10001:10000倍);
    3. 20100 ng/ml二抗(以1 mg/ml储存液稀释1:100001:50000倍)。
    4. 简单易用:可替代其它公司的ECL发光底物,操作步骤无需进行特别优化;
    5. 灵敏度更高:可检测从低微克级(Low-microgram10-6)至低皮克级Low-picogram10-12的蛋白条带
    6. 信号持续时间更长:光信号持续时间长达2-5小时;
    7. 稳定试剂:工作液室温下5小时有很好的稳定性;试剂盒在4℃密封避光下可稳定放置长达1年;
    8. 更多成像方法:适用于X射线胶片、CCD或激光成像仪;
    9. 价格更经济:相比其他品牌的类似产品,不仅具有高品质和高性能,同时价格也更低。
    二、用途
    用于HRP标记抗体的Western BlotHRP标记探针的核酸杂交。
    三、使用方法
    1、执行常规SDS-PAGE、转膜和Western blot步骤。注意用HRP标记lgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。
    操作概述
    注:优化抗原和抗体的浓度。必须使用建议的抗体稀释度,以保证阳性结果。
    1)将一抗浓度稀释到0.11 mg/ml
    2)将二抗浓度稀释到20100 ng/ml
    3)将A液和B液两种组份按1:1比例混合,制备发光工作液;
    (注:暴露于日光或任何其他强光可能损害工作液,为获得最佳结果,将此工作液保存在琥珀色瓶中,并避免长期暴露于任何强光。短时间暴露于实验室常规照明不会损害该工作液)
    4)将印迹膜在ECL发光工作液中孵育35分钟。
    5)吸出多余试剂。用清洁的塑料膜盖住该印迹膜。
    6)使印迹膜在X光胶片上曝光。
    2Western Blot最后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液:分别取等体积的溶液AB,放入干净容器中混合。建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。
    3、用镊子取出膜,搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液(0.010.1 ml发光工作液/cm2膜)中,与发光工作液充分接触。室温孵育35分钟,准备立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度,有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应,使用过少的发光工作液不利反应进行,也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度。为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。
    4、用镊子夹起膜,搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。
    5、打开X光胶片暗盒,在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将Western blot膜贴在保鲜膜上,将保鲜膜折起来完全包裹Western Blot膜,去除气泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖Western Blot膜的保鲜膜固定在暗盒内,蛋白带面向上。
    6、暗房内压X光胶片,分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。

    四、储存方法
    4 ℃密封避光保存1年以上。短期可放置室温。
    五、安全性
    无特殊毒性,按普通化学品处理。
    、注意事项
    1、步骤15可在日光灯下操作;但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。
    2、长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。
    3、发光工作液孵育约3分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见,低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使X光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使X光胶片感光,因而弱带可曝光1-5小时。如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL发光和曝光。
    4由于发光液灵敏度高,抗体浓度过高将造成高背景或没有条带,导致失败,所以要适度优化抗体浓度。
    5、某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。
    6、使用肉眼可见的预染色蛋白Marker和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。
    7NaN3能抑制HRP活性,回收第二抗体应避免使用NaN3,如必需使用勿超过0.01%


     

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