- ￥252 - 916
- 百生跃
- 中国
- BR2000143
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避光,2-8℃
- 保质期：
1年
- 英文名：
ECL Western Blot Substrate Kit(ultra high sensitivity)
- 库存：
999
- 供应商：
百生跃
- 规格：
50mL/250mL/500mL/100mL
| 规格： | 50mL | 产品价格： | ￥252 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 250mL | 产品价格： | ￥642 |
| 规格： | 500mL | 产品价格： | ￥916 |
| 规格： | 100mL | 产品价格： | ￥450 |
01/ 产品介绍
ECL Reagent 是一种基于鲁米诺的高灵敏性、非放射性化学发光底物，用于检测免疫印迹中固定在膜上的标记有辣根过氧化物酶（HRP）的蛋白。 鲁米诺在酶的催化作用下发生氧化降解，在增强剂的作用下发射波长为 428nm 的极强的光信号，持续时间长、稳定性高，检测方便。
| 产品包装清单 | |||||
| 50mL | 100mL | 250mL | 500mL | ||
| BR2000143.1 | 试剂 A | 25mL | 50mL | 125mL | 250mL |
| BR2000143.2 | 试剂 B | 25mL | 50mL | 125mL | 250mL |
| BR2000143.m | 说明书 | 1 份 | 1 份 | 1 份 | 1 份 |
| 质量标准及安全说明 | ||
| 原料及包装名称 | 质量标准 | 主要毒性 |
| 试剂 A | —— | —— |
| 试剂 B | —— | —— |
03/ 产品运输和保存条件
【运输】本品冰袋运输。
【保存】 2-8℃避光保存， 1 年有效。
04/ 产品使用说明
1. 按常规方法完成 SDS-PAGE 和电转膜操作，并用封闭剂封闭膜上的非特异结合位点，室温下摇晃封闭 1 小时或 2-8℃静置过夜。
2. 弃封闭液， 加入一抗工作液， 室温下摇晃孵育 1 小时或2-8℃静置过夜。
3. 用洗膜缓冲液漂洗膜 2 次，然后用充足体积的洗膜缓冲液洗膜 4-6 次， 每次 5 分钟。
4. 用 HRP 标记二抗室温孵育 1 小时。
5. 重复步骤 3，彻底洗掉没有结合的二抗。
6. 将试剂 A 和试剂 B 按 1:1 的比例混合成 ECL 工作液， 将膜完全浸入并与发光工作液充分接触（约 0.125mL 发光工作液/cm2膜）。 室温孵育 3 分钟后立即压片曝光。
7. 用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。
8. 在 X 光胶片暗盒内面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将杂交膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包裹杂交膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内，最好蛋白带面向上。
9. 在黑暗中放入 X 感光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。
05/ 注意事项
1. ECL 工作液配制过程中吸取试剂 A 和试剂 B 时务必更换枪头。为了保持灵敏度，工作液应现配现用，不宜久置。
2. 强条带发光在暗房中肉眼可见，低丰度蛋白条带发光较弱，肉眼虽不可见但能使 X 胶片曝光。不能单凭肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使 X 胶片感光，因而弱带可曝光 1-10 小时。如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用 ECL 发光和曝光。
3. NaN3会抑制 HRP 反应， 实验中及回收二抗应避免使用含NaN3的缓冲液。
4. 实验中应全程戴手套并使用清洁的平口镊子夹膜， 避免用手直接接触膜。
5. 某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光， 如遇此情况可尝试更换保鲜膜。
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文献和实验时样本之间干扰。 Q：说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ，细胞量多的话对检测结果有没有影响？ A：建议细胞量最多不要超过 106个，过量的细胞相当于染料被稀释，影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了，通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q：是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer？ A：不行，Binding Buffer 是必须要加的，Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+，Binding
1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活，必须了解酶催化反应总的反应式，而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量，使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
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