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- 详细信息
- 用户评价
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃
- 规格：
100ml
产品名称：WB封闭液
产品概述：WB封闭液(Blocking Buffer)可以用于Western Blot时转移了蛋白样品的PVDF膜或NC膜的封闭。封闭后，可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合，降低背景，增强信噪比。
包装信息：
| 试剂名称 | WLA066a | 保存条件 |
| WB封闭液 | 100ml | 4℃ ，3-6个月 |
注意事项：
通常在室温封闭60min即可。如果对于一些背景非常高的抗体，可以4℃封闭过夜
该产品被引用文献（仅展示部分）：
1、Zhang S; Sun B; Wang D, et al., Chlorogenic Acid Ameliorates Damage Induced by Fluorene-9-Bisphenol in Porcine Sertoli Cells. Front Pharmacol 2021, 12, 678772.
PubMed: 34177588
2、Xiao Y; Yuan B; Hu W, et al., Tributyltin Oxide Exposure During in vitro Maturation Disrupts Oocyte Maturation and Subsequent Embryonic Developmental Competence in Pigs. Front Cell Dev Biol 2021, 9, 683448.
PubMed: 34262900
操作流程:
根据WB试验流程进行，用WB封闭液室温封闭1h即可，如有需要可以37℃孵育或延长孵育时间。
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文献和实验PubMed: 34177588
2、Xiao Y; Yuan B; Hu W, et al., Tributyltin Oxide Exposure During in vitro Maturation Disrupts Oocyte Maturation and Subsequent Embryonic Developmental Competence in Pigs. Front Cell Dev Biol 2021, 9, 683448.
PubMed: 34262900
奶粉封闭，就会背景脏得不得了。还有一点就是脱脂奶粉的 IgG 能和抗山羊的二抗有交叉反应……所以……第二种封闭液就是 BSA，这个相对来说贵一些，一般会用于一些磷酸化的 WB 里。但是，有些 BSA 偶联的多肽要做 WB 的话，就绝对不能用 BSA 作为封闭液。第三种封闭液估计你们不会特别常用，其实就是吉利丁，做过布丁或者慕斯蛋糕的同学可能知道这是啥。其实就是 Fish Gelatin，鱼明胶，但是这种封闭液成分价钱很傲娇，所以平时没什么人会使用这个。还有一种比较常用的封闭液，就是 0.25 - 2%
① 膜封闭时间不够，室温下通常摇床孵育膜 1h，出现这种情况可以更换合适的封闭液或者适当延长封闭的时间； ② 抗原抗体免疫过程中一抗稀释度太高，可以多设置几组一抗浓度，摸索最适宜的抗体稀释度； ③ 在整个实验过程中膜发生干燥或手套反复接触过也会发生背景值高的情况，因此实验过程中要注意保持膜的湿润，使用镊子夹取膜。 3、WB 结果中有杂带干扰 ① 抗体纯度不高会产生非特异性条带影响结果，高纯度抗体条带特异性更好，建议更换抗体； ② 一抗浓度过高，降低一抗稀释比，目的条带和杂带可能会减弱
Buffer 配方 1.0 mol/L Tris•HCl（pH 6.8） 溶解后，用浓盐酸调 pH 至 6.8，最后用超纯水定容至 250 mL，高温灭菌后室温下保存。 1.5 mol/L Tris•HCl（pH 8.8） 溶解后，用浓盐酸调 pH 至 8.8，最后用超纯水定容至 250mL，高温灭菌后室温下保存。 10% SDS 取 SDS 10g，加蒸馏水至 100 mL， 50 ℃ 水浴下溶解，室温保存。如在长期保存中出现沉淀，水浴溶化后，仍可使用。 10% 过硫酸胺（APS） 取
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