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- 百奥莱博
- RFT110-HZC
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
84
- 英文名：
pRT20-T vector
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃，避免反复冻融
- 规格：
20次
特别提示：包括pRT20-T载体克隆试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：pRT20-T载体克隆试剂盒
英文名称：pRT20-T vector
产品货号：RFT110
产品规格：20次
pRT20-T 载体是一种高效克隆PCR产物(TA Clonging)的专用载体。它是由pUC19载体改造成的(pRT20-T载体在pUC19质粒MCS位点附近插入T7启动子序列)，MCS位点经过EcoR V酶切后在两侧的3’端添加”T”制备而成。因大部分Taq酶会在PCR产物的3’末端添加一个“A”，所以用本载体可以高效地进行PCR产物克隆。
试剂盒组份：
| 内容 | 浓度 | 总量 |
| pRT20-T vector | 25 ng/μl | 20μl×1支 |
| 2×ligation solution | - | 150μl×1支 |
| Control insert(700bp) | 12.5 ng/μl | 10μl×1支 |
| M13F(-47) | 10μM | 20μl×1支 |
| M13R(-48) | 10μM | 20μl×1支 |
| Water(RNase-free,DNase-free) | - | 1ml×1支 |
本载体在pUC19载体的基础上对LacZ基因的编码序列进行了改造，加强了重组菌落在X-gal/IPTG/Amp/LB琼脂平板上的颜色筛选，具有更明显的蓝色菌落颜色，大大降低了假阳性率。由于在MCS位点附近插入了T7启动子序列，因此可以对插入DNA片段直接进行体外转录实验。
本载体在插入位点两侧各有一个BamH I位点，可以用BamH I直接酶切检测重组子，简化了检测程序。按照标准连接体系计算(10μl体系用1μl载体)，本载体可至少使用20次。包装内含有了2×ligation solution，是混合有T4 连接酶，连接buffer以及连接增强剂的MasterMix，使用方便，且能显著提高连接效率。另外，包装内提供M13引物，可以方便用菌落或菌液PCR快速检测阳性克隆。
储存条件：-20℃，避免反复冻融。
我公司销售的pRT20-T载体克隆试剂盒北京厂家，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验，能够以模版为准切掉错配的碱基，因而得到的PCR产物多数是平末端，不能用T载体克隆。通常需用目的载体多克隆位点上的平末端单酶切位点，单酶切得到平末端的线性片断，直接连接PCR产物。这类酶得到的产物通常不能用TA克隆试剂盒。目前也有商业化的平末端PCR产物克隆试剂盒，不过较少用。平末端的连接效率低，通常需要高浓度的连接酶，较长的连接时间，合适的片断：载体比例，有的时候还需要调整反应体系的ATP浓度或者增加聚乙二醇（PEG2000），以得到较高的连接效率。许多厂家都有推出快速连接试剂盒
在相同的模板、引物和反应体系下，用ABI7000荧光定量PCR仪也进行了其荧光定量产品和国际知名厂家A品牌，以及T品牌相关产品的对比实验。 实验材料 小鼠肝脏组织 实验方法 RNA提取：BioTeke RNApure高纯总RNA提取试剂盒，操作步骤请参考说明书。 目的基因：小鼠管家基因β–actin cDNA制备：测定小鼠肝脏总RNA浓度后，使用BioTeke Super RT Kit 制备20μl cDNA.操作步骤参照试剂盒说明书。 二步法荧光定量PCR： 小鼠
吸光度（OD值），根据OD值判断HIV抗体的存在与否。 3、性能参数 灵敏度高（0.5ng/ml） 4、标本要求 （1）标本类型：血清，血浆。 （2）标本采集：见标本采集手册 （3）标本储存和运输：室温放置不超过8小时，2-8℃不超过72小时，-20℃可长期保存，应避免反复冻融 （4）标本拒收状态：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。 5、容器和添加剂类型 6、试剂 （1）试剂名称：人类免疫缺陷病毒HIV(1+2)型抗体诊断试剂盒。 （2）试剂生产厂家
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