- ¥380 - 3800
- 百奥莱博
- GS0130-EGR
- 北京
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
360
- 英文名：
DH5α Competent Cells
- 保质期：
半年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
- 规格：
10×100μl|20×100μl
特别提示：包括DH5α感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：DH5α感受态细胞
英文名称：DH5α Competent Cells
产品货号：GS0130
产品规格：10×100μl|20×100μl
储存条件：超低温（-80℃）
概述
DH5α Competent Cells，该菌株是一种常用于质粒克隆的菌株，E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补.可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株
特点
- 转化shǒu选
应用
该菌株是一种常用于质粒克隆的菌株，E.coli DH5α在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补.可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株
使用说明
1.-80℃冰箱内取出E.coli DHα Competent Cells，迅速插入冰盒内，使其溶解。2.加入DNA样品轻轻混匀，冰中放置30分钟。3.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中放置2分钟，注意不要晃动。添加700μl不含抗生素的无菌培养基，混合均匀。4.37℃振荡培养1小时(160-225rpm)，吸取适量体积均匀涂布到含相应抗生素的LB琼脂培养基平板中。37℃正置至液体被吸收，然后倒置过夜培养。
组份
E.coli DH5α Competent Cells 10 x 100 μl/20 x 100 μl,pUC19 plasmid(0.1ng/μl)10 μl
技术规格
| 规格 | 10 x 100 μl/20 x 100 μl |
| 转化效率 | 使用pUC19质粒DNA检测，转化效率高达107cfu/μg DNA以上。 |
| 保存条件 | 长期储存于-80℃，可保存半年，避免反复冻融。 |
我公司销售的DH5α感受态细胞北京品牌，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞：处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子)：带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞，用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态，然后与 pUC18质粒共保温，实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因，因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性，用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释，在含氨
型信息可以判断目的质粒是否可以使用这个感受态细胞来进行扩增，以及是否可以进行目的实验。例如 DH5α基因型：F-, φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA, supE44 , λ-, thi-1, gyrA96 , relA1。基因型信息中有 lacZΔM15，说明其表达产物可以与 PUC 质粒编码表达的β-半乳糖苷酶的α肽段实现α互补，因此可以选择用 DH5α感受态来扩增
4．操作步骤 1）大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落，接种于3～5ml LB液体培养中，37℃振荡培养12h左右，直至对数生长期。将该菌悬液以1:100～1:50转接于100ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20～30min测一次OD600nm，至OD600nm≤0.5时停止培养；(2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中，在冰上冷却20-30min，于4℃，4000r／
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