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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
XL10-Gold Chemically Competent Cell
- 库存:
430
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货XL10-Gold化学感受态细胞打折促销,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货XL10-Gold化学感受态细胞打折促销
品牌:百奥莱博
编号:SY0018
英文名:XL10-Gold Chemically Competent Cell
XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,特别适合于大分子量DNA的高效转化。具有四环素和氯霉素抗性,使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg,
本品基因型:TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F´proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。
主要具有如下特点:
① Hte表型可增强较大分子量质粒和连接产物的高效转化;
② 具有限制性内切酶缺陷性,更利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取;
③ 更适于质粒文库的构建;
④ 具有lacIqZΔM15,可用于蓝、白斑筛选。
注意事项
1)感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3)为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,且每次转化感受态使用量,不低于100μl。
4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,最低化实验可能遇到的风险。
使用方法
1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2)向100μl感受态细胞悬液中加入0.1-50ng(<10μl /100μl感受态)目的DNA或2μl连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30min。
3)置于42℃水浴中热激30s,然后快速将管转移到冰浴中,冷却2-3min,该过程不要摇动离心管,否则会降低转化效率。
4)向离心管中加入900μl 42℃预热的无菌NZY+培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养1h(225-250rpm),目的是促使菌体复苏。
【注】:此步也可用LB培养基(不含抗生素)进行菌体复苏。
5)取上述≤200μl转化产物涂至含有相应抗生素的LB固体平板上,将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
【注】:如需做蓝白斑筛选,需至少孵育17h,以充分显色。
储存条件:-80℃
更多有关北京现货XL10-Gold化学感受态细胞打折促销的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·考马斯亮蓝R250
编号:SY0346
英文名称:Coomassie Brilliant Blue R250
规格:10g
考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue)是两种相似三苯甲烷染料的总称,有G250和R250两种,结构上前者比后者多了2个甲基,命名上 “G”为Green 的缩写,因G250的蓝色染料泛浅绿色;命名上“R”为Red的缩写,因R250的蓝色染料呈微红色调;“250”表示考马斯亮蓝的纯度。生化实验中常将考马斯亮蓝用于蛋白定量和蛋白电泳中蛋白染色。工作原理是:通过与蛋白质内的氨基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力,考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子(如磺酸基),从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。
考马斯亮蓝R250(Coomassie brilliant blue R250)更多用于电泳蛋白的染色,染色灵敏度比氨基黑高5倍,可达0.1µg蛋白。R250染色后需要褪色,才能进行蛋白条带的观察。
考马斯亮蓝G250的检测灵敏度虽然较低,但也可替代R250,使用一种快速而简单的方法进行蛋白染色。因其具有以下特性,即在低于pH 2.0时,溶液无色;pH 7.0时溶液呈深蓝黑色;若发生酸化,溶液呈现透明的棕褐色。当G250与蛋白结合,溶液又回到蓝色,主要因为蛋白分子周围具有更偏中性的pH环境。合适条件下,当把胶放在酸化的G250溶液中染色,显示出蓝色的蛋白条带,背景呈浅琥珀色。此种方法条带快速显色,且背景颜色也很浅使得条带看起来很清楚,则不需要做褪色处理。大部分蛋白用G250检测的下限是0.5µg。虽然灵敏度降低,取而代之的是操作快速以及方便,比R250染色节省高达11 h。
中文别名:考马斯亮兰R250;酸性蓝83;酸性艳蓝6B;亮蓝R;
英文别名:Brilliant Blue R; Brilliant Indocyanine 6B; C.I. number 42660; Acid Blue 83;
CAS:6104-59-2
分子式:C45H44N3NaO7S2
分子量:825.97
外观:暗红色至深暗红或暗色粉末
溶解性:溶于热水(1 mg/ml),乙醇和甲醇
储存条件:室温
结构式

使用方法
1. 标准染色步骤(考马斯亮蓝R250)
1) 蛋白电泳凝胶置于50%甲醇,10%醋酸,40%水溶液中固定,水平摇床上低速摇动30min~过夜;
2) 去除固定液,更换0.25%考马斯亮蓝R250染色液(0.25% R250 溶于50%甲醇,10%醋酸,40%水溶液)完全覆盖住胶,染色2-4h。直至胶染成均匀的蓝色。注意:当胶在染色液内肉眼不可见时,说明染色完成,否则与深色的染色液对比,凝胶区域看起来颜色偏浅。
3) 将胶重新放置在5%甲醇,7.5%醋酸,87.5%水溶液中脱色4-24h。约1-2h后蛋白条带即可看到,直至背景变透明后脱色才结束。中间可更换2-4次脱色液;
注意:此方法可检测到的蛋白量最低达到0.1µg蛋白/条带。
4) 将胶存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。
2. 快速染色步骤(考马斯亮蓝R250)
1) 蛋白电泳凝胶在25%IPA,10%醋酸的水溶液中固定30-60min;
2) 将胶放置在10%醋酸的水溶液中进行染色,含有60 µg/ml的考马斯亮蓝R250。约30min后条带显示,让胶继续染色直至达到理想的蛋白条带。在此染色方法中胶的背景染色比较浅,由于使用胶的浓度很低。
3) 将胶重新放在10 %醋酸溶液中脱色2h或更长。期间可更换2-4次脱色液;
4) 将胶存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。
注意事项
1)0.25%考马斯亮蓝R250染色液配置的过程中,需要先用甲醇溶解R250粉末后,再加入醋酸和水,一般情况下不需要滤纸除杂。溶液可在4度存放6个月,若长时间保存出现沉淀,可用滤纸过滤得到澄清液体。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
北京现货XL10-Gold化学感受态细胞打折促销关键词:SY0018,XL10-Gold化学感受态细胞,XL10-Gold Chemically Competent Cell
·微囊藻素(PP1和PP2A抑制剂)(Microcystin-LR)
编号:SY0333
英文名称:Microcystin-LR (Inhibitor of PP1 and PP2A)
规格:500μg
微囊藻素Microcystin-LR是一种分离自蓝藻细菌 Microcystis aeruginosa的环状七肽毒素,可有效抑制蛋白磷酸酶PP1(protein phosphatase 1 ,PP1)和 PP2A ( protein phosphatase 2A ,PP2A),抑制PP2A和PP1的IC50分别为0.04nm、1.7nm。Microcystin-LR结合磷酸酶后通过共价作用使其活性亚基失活。
Microcystin-LR对蛋白酶没有作用,因此常作为一种磷酸酶抑制剂用于蛋白激酶研究中。
CAS:101043-37-2
分子式:C49H74N10O12
分子量:995.2
纯度:≥95%
外观:粉末
溶解性:溶于DMSO,甲醇
储存条件:-20℃,有效期1年
结构式:

北京现货XL10-Gold化学感受态细胞打折促销关键词:SY0018,XL10-Gold化学感受态细胞,XL10-Gold Chemically Competent Cell
ARB13920 猪角化细胞生长因子(KGF)尿液中含量检测 Porcine keRatinocyte growth factor,kgf ELISA KIT
PY01-134 溶菌酶(1:15000) 1克
L-胱硫醚 Indomethacin 56-88-2
BL0815 HRP标记羊抗猪IgG抗体
F030428 胶体金标记兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG*GOLD
PBS缓冲液 Zein
ARB13142 小鼠总胆汁酸(TBA)酶联免疫定量检测
ARB13174 小鼠致癌基因相关蛋白KCelisa检测 Mouse kc ELISA KIT
ARB10098 人EB病毒IgM(EBv IgM)ELISA代测服务 Human epstein-barr virus igm,ebv igM ELISA KIT
BTN120419 大肠杆菌DNA连接酶 E.coli DNA Ligase
79-06-1 丙烯酰胺 Acrylamide
F030829 BIOTIN标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*BIOTIN
ARB13681 兔血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)血清中含量检测 Rabbit vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
ARB13670 兔主要组织相容性复合体I类(MHCI/RLAI)Elisa分析 Rabbit major Histocompatibility complexi,mhci/rlai ELISA KIT
SJ0701 双色预染宽分子量蛋白Marker(10-170kD)
ARB13317 山羊孕酮(PROG)酶联免疫定量检测
ARB14123 人17β-雌二醇elisa检测
BTN110810 病毒沉淀剂 Virus Precipitation Reagent
三苯基甲烷 Glycine ethyl ester HC1 519-73-3
F020235 兔抗人γ链抗体 Rabbit Anti-Human IgG (γ chain)
CYB161074 猴IgG(液体-pH7.2PBS)
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文献和实验摘要: Stratagene的XL10-Gold®几乎算得上是高效转化的代名词了,研究者一旦要克隆大质粒、连接DNA和建库,克隆甲基化DNA,进行蓝白斑筛选等,首选的就是XL10-Gold®和其衍生菌. 国外的同学说一般他们克隆都是直接购买 感受态细胞 转化,实验效率很高的.我总是以为如果是一般的克隆实验,自己做感受态好像够用
菌基因型,并使细胞生长加快(当天获得菌落),已经成功应用于25kb超螺旋DNA和8kb连接DNA的克隆。XL10-Gold®,BL21-Gold,BL21-CodonPlus®,SoloPack® Gold 和96Pack® Gold等系列细胞都带有这个新的性状。超级感受态细胞Stratagene提供多种>5 x109 转化子/μg 超螺旋DNA转化效率的化学法超级感受态细胞正是克隆获得大质粒、连接DNA克隆和建库时最值得推荐的。电转化感受态细胞Stratagene的电转化感受态细胞特别耐受电击处理
的宿主菌基因型,并使细胞生长加快(当天获得菌落),已经成功应用于25kb超螺旋DNA和8kb连接DNA的克隆。XL10-Gold®,BL21-Gold,BL21-CodonPlus®,SoloPack® Gold 和96Pack® Gold等系列细胞都带有这个新的性状。超级感受态细胞 Stratagene提供多种>5 x 109 转化子/μg 超螺旋DNA转化效率的化学法超级感受态细胞正是克隆获得大质粒、连接DNA克隆和建库时最值得推荐的。电转化感受态细胞 Stratagene
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