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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1000
- 保修期:
3年
- 现货状态:
现货
- 供应商:
上海科渊生物技术有限公司
- 规格:
96支/盒
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文献和实验缓冲液(50´储存液),10´加样缓冲液,1.5ml离心管装入铝制饭盒(灭菌)、移液器吸头装入相应的吸头盒(灭菌)。 6.操作步骤 (1)混合下列溶液于一个无菌的1.5ml微量离心管中: Pinpoint™xa-3 DNA (或pUCm-T-CHI ) 6 μl 10×酶切缓冲液(用EcoRV的缓冲液) 2 μl ddH2O 30 μl EcoRV 1μl BamHI 1μl 总体积 40μl (2)先准备一个冰盒并放入一定量的冰块。从-20℃冰柜中取出限制性内切酶,立即插入冰块中
样品,我们按照标准的解交联和 DNA 纯化步骤回收了其中的 DNA 样品,一部分进行了 DNA 浓度测定,然后将剩余的 DNA 样品利用 1% 的琼脂糖电泳进行分离检测,如下图所示:Lane 1:0.5ulLane 2:1.0ulLane 3:1.5ul从上图我们可以看出,微球菌酶切后,染色质 DNA 的分布主要是在 150,300,和 500bp 左右,但由于 2 号泳道的样品在 1000bp 以上的片段切割的更加充分(没有太多信号),所以我们决定利用 2 号泳道对应的染色质进行后续 ChIP
装入相应的吸头盒,一起高压灭菌(121°C 30min)。 6.操作步骤 (1在超净工作台中取5ml LB(Ampr),加入灭菌的摇菌试管中。 (2从超低温冰箱中取出保存Pinpoint™xa-3载体的菌种和pBS-CHI的菌种(操作完后迅速把菌种放回超低温冰柜中,切不可将菌融化!),在超净工作台上用烧红的接种环刮一下,再把接种环于无菌LB培养液(含100µg/ml氨苄青霉素)中搅拌一下,37°C摇床中摇12~16h。Pinpoint™xa-3菌: 接种于5ml LB(Ampr); pBS











