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- 百奥莱博
- HR0351-NSG
- 北京
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
104
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
100ml
特别提示：包括抗体去除液(Western)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：抗体去除液(Western)
产品货号：HR0351
产品规格：100ml
本产品可以对同一张膜进行多次Western Blot检测。在室温条件下，将用过的膜浸泡在抗体去除液中30-60分钟，可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后，可以使用不同的抗体进行下一轮Western Blot实验，因而可利用同一张膜进行多次蛋白检测。适宜从少量样品多次检测多种不同蛋白质。采用这方法多次检测同一张膜上的蛋白，能省去蛋白电泳和膜转移等费时费力的步骤。
储存条件：室温保存
有效期：一年
用途：
清除硝酸纤维素膜或PVDF膜上结合的抗体，不影响抗原蛋白。
使用方法：
1．将膜充分浸泡于适当体积的抗体去除液中，室温孵育15-30分钟并不时晃动。孵育时间的长短应根据实验条件进行优化。洗脱某些抗体需要较长的时间如30-60分钟。
2．用镊子取出膜，用自备Western Blot 洗涤缓冲液快速淋洗膜一次，然后用TBST洗膜3次，每次10分钟。
3．此时膜上抗体已去除膜已经再生。用脱脂奶粉或BSA 封闭一小时，进行下一轮Western Blot实验。
注意事项：
1．有许多因素影响抗体从膜洗脱，如膜类型、抗体类型和浓度及其与抗原结合特性。因此需要优化抗体去除液中孵育膜的时间。
2．确定膜上抗体是否去除与优化抗体去除液孵育膜的时间：用ECL 工作液孵育再生后的膜约1分钟，然后进行X 光胶片曝光并显影，可确定膜上的抗体是否完全去除。如胶片上显示条带，表明抗体未完全去除，应继续将膜浸泡在抗体去除液中另外孵育30-60分钟。然后再次ECL检查膜上抗体是否去除。重复此步骤直到抗体完全去除并确定zuì佳孵育时间。
3．使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA 封闭的膜上的抗体更容易被去除下来。因此准备进行再生的膜，应该使用脱脂奶粉而不是BSA 封闭。
4．尽量避免使用干燥保存的膜，干的膜上的抗体很难被去除干净。
5．PVDF膜上使用的效果好于硝酸纤维素膜。
6．使用非化学发光试剂进行的Western检测，例如DAB，NBT/BCIP，不适用于本试剂。
我公司销售的抗体去除液(Western)北京厂家，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线：用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线，具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品，每个浓度（0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA，其余用 PBS 补齐至 20 μL）梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度：10 倍稀释法：取 18 μLPBS+2 μL 样品上清（经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min
培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌
时间：60-90 min 转膜设备: 北京六一 半干转 建议：转膜缓冲液用新鲜配制的，可先配成2倍的母液，转膜液的多少会影响电转的效率，一般将吸水纸润湿即可，不要和膜一起浸泡，这样效果很好。 蛋白来源：人肝癌肿瘤细胞 蛋白名称（可保密）：notch 蛋白分子量：60-120 KDa WB用膜类型、孔径：pall NC膜 0.45 um 转膜方式（恒压、恒流）：恒流 0.3 A 转膜时间：-20度冰柜120 min 转
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
