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- 国产/进口
- XK-JZ-1399
- 2025年12月03日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
详询
- 保质期：
三年
- 英文名：
Pichia farinosa
- 库存：
5
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 规格：
株
菌种名称：粉状毕赤酵母
拉丁文名称：Pichia farinosa
其他编号：TISTR 5105=CCRC 21881
培养温度：25-28
用途：生产的单细胞蛋白
分离源：木薯厂的废水
相关培养基：Wort Agar （麦芽汁琼脂）
所购菌种如果为冷冻干燥安瓿，建议采用下列方法恢复培养（供参考）。
一、安瓿管开启
1.用浸过75％酒精的脱脂棉球檫净安瓿管表面。
2.用酒精灯火焰将安瓿管顶端加热。
3.将冷的无菌水滴至加热的安瓿管顶端使玻璃裂开。
4.用无菌的镊子敲开安瓿管顶端。
二、菌种恢复培养
1.用无菌吸管加0.3ml无菌水于安瓿管内，使冻干菌种块溶化呈悬浮状。
2.用无菌吸管取0.1ml悬浮液于己制备好的适宜该菌生长的斜面培养基上，涂匀，在适宜的温度下培养。
三、注意事项
1.全部操作过程需在无菌条件下进行。
2.每支安瓿的菌悬液最多只能接3-4支斜面，避免接种量太少不利于菌种生长。有些菌种经冷冻干燥后，需连续两次继代培养才能正常生长。
3.要求在厌氧条件下培养的菌种，自开封后的全过程，均需按厌氧菌培养条件的要求处理。
4.此安瓿管一次性使用完。
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文献和实验1931 年由尤勒（ U.S.von Euler ）和加德姆（ J.H.Gaddum ）发现的肽类，存在于脑及肠管组织中，有降血压和肠管收缩作用。 1971 年从丘脑下部分离出 P 物质的一种，确定了如下结构： Arg-Pro-Lys- Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH 2 。这种物质有使神经元兴奋的强力作用，一般认为与化学递质有密切关系。由于初次单独分离出来的状态是粉状物，故称 P 物质。
孵育10min。 6) 室温750g离心10min，小心抽吸PEG/CaT溶液，颠倒管，轻叩管壁以排出多余的PEG/CaT溶液。 7) 用150ulSOS培养基悬浮转化细胞，室温孵育20min。 8) 加入850ul1M山梨醇，接下来涂板。 2. 涂板：毕赤酵母去壁细胞需要铺在顶层琼脂糖或琼脂上，以防止在选择前被裂解 1) 接第8步，取100-300ul去壁细胞-DNA，与10ml融化的RD琼脂糖混匀倒于RDB平板
实验步骤 1. Mut 胞内或分泌表达：为检测表达条件是否有效，可培养GS115β-gal (Mut )(胞内表达-半乳糖苷酶)。亲代载体转化GS115 或KM71 作为胞内表达背景对照。 1) 挑取单克隆，接种至25mlMGY，BMG或BMGY中，(250ml摇瓶)，28-30度，250-300rpm摇至OD600=2-6(对数生长，大约16-18小时)。 2) 室温1500-3000g离心
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