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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Rabbit anti-HRP whole serum
- 供应商:
信帆生物
- 规格:
500ul
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文献和实验一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白,辛酸为短链脂肪酸,在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质;第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来,操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE电泳检测能得到电泳纯度较高的Ig。三、仪器、原料和试剂1、仪器磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。2、原料抗血清(兔抗鸡血清)。3、试剂(1) 乙酸-乙酸钠缓冲液:60mmol/L,pH
免疫用的双抗原。动物免疫。动物:体重分别为2.5kg和3.0kg的雄性家兔2只。免疫:初次免疫是将含HRP20mg,IgG5mg的双抗原加等体积的福氏不完全佐剂多点、多部位注射于每只家兔的四肢。间隔1月后用原剂量的双抗原加福氏不完全佐剂以同样方式进行第二次免疫。3周后用加倍的双抗原经耳静脉注射。7d后试血,当兔抗人IgG抗体和抗HRP抗体效价达1:32以上时颈动脉放血,分离血清-20℃保存。将双抗血清与人IgG和HRP同时做双扩散试验。琼脂免疫双扩散第1孔为双抗血清,第2孔为人IgG、第3孔
免疫用的双抗原。动物免疫。动物:体重分别为2.5kg和3.0kg的雄性家兔2只。免疫:初次免疫是将含HRP20mg,IgG5mg的双抗原加等体积的福氏不完全佐剂多点、多部位注射于每只家兔的四肢。间隔1月后用原剂量的双抗原加福氏不完全佐剂以同样方式进行第二次免疫。3周后用加倍的双抗原经耳静脉注射。7d后试血,当兔抗人IgG抗体和抗HRP抗体效价达1:32以上时颈动脉放血,分离血清-20℃保存。将双抗血清与人IgG和HRP同时做双扩散试验。琼脂免疫双扩散第1孔为双抗血清,第2孔为人IgG、第3孔
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