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- 详细信息
- 文献和实验
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- 英文名:
Recombinant human VILIP1 Protein
- 供应商:
信帆生物
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文献和实验佚名 基因工程又称遗传工程,是生物工程的主导技术。DNA重组技术或分子克隆是基因工程的核心。分子生物学研究中发现的许多核酸酶类都可用作基因工程的工具。其中能识别特定的回文序列并切割DNA双链的Ⅱ类限制性核酸内切酶在DNA重组技术中被广泛应用。 当前目的基因序列主要来源于自然界的生物,无性繁殖的纯基因称为基因克隆,目的基因或核酸序列必须
【实验目的】1.掌握DNA重组技术的基本原理和基本方法2.熟悉质粒DNA的小量制备及酶切鉴定方法【实验原理】1.DNA重组技术 重组DNA(Recombinant DNA)技术是遗传工程的核心技术,也是人类在基因和DNA分子水平进行操作的技术。它包括以下几个步骤: 1)重组DNA分子的构建:即将目的基因(DNA或cDNA片段)与载体DNA重组,应用TA克隆方法,将PCR扩增产物快速克隆至质粒载体中。该方法利用了PCR过程中使用的热稳定聚合酶(Taq酶)在所复制的双链分子末端加上单一脱氧
【转帖】教你一种简单、高效的提高重组蛋白质的诱导表达量的方法
。 实验步骤: 1.设计目的重组蛋白质的N端10-15个氨基酸的简并序列。 2.引物合成上述简并序列,同时设计合成目的基因反向引物。 3.PCR扩展目的基因,这样在目的基因的5‘端就引入了兼并序列,同时不改变氨基酸序列。 4.双酶切,插入到目标载体。 5.转化。 6.挑选多个克隆(比如100-200个)到1.5ml EP管,直接诱导表达(记得带上为改造克隆菌株的对照)。 7.SDS-PAGE检测。 8.挑选高表达的多个克隆,测序。 怎么样?是不是很简单,不需要做太多的摸索
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