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上海邦景
Mediomics公司于2001年创立于美国密苏里州,致力于为科研机构、即时检测、医药企业以及医疗和环境研究市场提供创新的检测试剂盒和生物传感器等产品,其检测试剂盒可以简单快速的定量检测生物学和临床相关的大分子物质,包括DNA、生物标志物、激素、抗体、细胞内信号分子、蛋白质复合物、细菌、真菌和病毒等。
Mediomics目前拥有四个核心专有技术:
1. Bridge-It?:一种快速灵敏的DNA-蛋白质结合物检测平台
Bridge-It?系列试剂盒可用来检测DNA结合蛋白及其配体和共调节因子。该系列试剂盒基于一个简单的实验原理:一段针对已知蛋白的具有序列特异DNA结合位点的DNA双链被分为两段,每段含有一个短的单链突出端。这些突出端很短,因此没有靶蛋白时他们不会自发的重新结合。当靶蛋白出现时,靶蛋白与完整的DNA序列结合位点的高亲和力使得两段DNA双链重新结合。通过在每段位点加入适当的荧光探针就可以检测到该结合。然后用荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer,FRET)检测荧光信号的变化来判断DNA结合蛋白或其配体。
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文献和实验。如今市面上只有Cruiser™和Surveyor两个品牌。因为Cruiser™价格合适,且相比于进口代理产品拥有货期短的优点(国内可以2-3天内到货),做到真正质优价廉。 据了解,另一种被广泛应用于基因敲除筛选的X酶,其最早并不是为了做基因敲除筛选而生产的。它除了识别错配外,还可以识别十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链 DNA,正是因为这个特点,很容易导致假阳性的现象。 图1. Holliday交叉(Holliday junction),无错配结构
【交流】阳性克隆筛选方法汇总——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法
保证是必要的,防止产生假阳性的结果。 4、 选择高特异性的错配酶 目前用的比较多的是CEL I和T7E I 两种酶,CELI是植物来源的一种特异性识别碱基错配的酶,活性高,不会产生假阳性。目前市面上只有CruiserTM和Surveyor和两个品牌。其中Surveyor是进口代理产品, 价格较贵,货期较长;CruiserTM价格合适,同时货期短,国内可以2-3天内到货,做到真正质优价廉。 T7E I是NEB的产品,最早并不是为了做基因敲除筛选用的。其最主要的特点是除了识别错配外
的克隆,可以很容易观察到2条分开的条带。 Taq酶,建议是用NEB的Fusion或者Q5,毕竟敲除本身很大可能也就是2-3个碱基的缺失,所以,高保证是必要的,防止产生假阳性的结果。 4、选择高特异性的错配酶; 目前用的比较多的是CEL I和T7E I 两种酶,CEL I是植物来源的一种特异性识别碱基错配的酶,活性高,不会产生假阳性。目前市面上只有CruiserTM和Surveyor和两个品牌。其中Surveyor是进口代理产品, 价格较贵,货期较长
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