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美国GENMED主要运用世界上最尖端的基因综合技术平台(数字化染色体基因型完全分析技术、表观基因组完全分析技术、染色体单体分离分析技术、基因靶标技术、全基因表达完全分析技术、RNA拼接图谱综合分析技术、SiRNA完整表达文库构建技术、细胞抗原谱学技术、胶体金层析法金标技术、蛋白激酶组学完全分析技术、蛋白表位标记技术、Seldi蛋白质谱分析技术、高容量细胞荧光筛选技术、高通量远红外细胞免疫筛选技术),从事疾病指纹诊断系统、农作物种子改造和分子操作、生物反应器、中草药和海洋生物抗肿瘤活性物质筛选、基yin检测中心、技术平台服务和培训等独步天下的杰美产品和服务体系的开发,以期成为基因医学产业化的领军企业。
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文献和实验相关专题 酵母感受态细胞制备可以:(1)用于建立酵母转化体系;(2)用于酵母表达系统 构建;(3)用于酵母其他分子生物学研究。 一、试剂与耗材 1. 试剂 细菌用-酵母提取物(Fisher)、 细菌用-蛋白胨(Fisher)、葡萄糖(Fisher)、细菌用-琼脂粉、去离子水、甘油(Sigma)、二甲基亚砜(Sigma)、聚乙二醇3350(Sigma)、醋酸锂(Sigma)、鲑鱼精子细胞DNA
1.5ml缓冲液B,彻底混匀; 30℃水浴孵育1h; 室温下2000g离心10min,去除上清液,菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C中; 离心样品,去除上清液,轻微操作将样品重悬于0.2ml缓冲液C中; 将所有转化液铺于选择性平板,于30℃孵育3~4天后,鉴定; 3、毕氏酵母电转化法 (1)E.coli TOP10F’感受态细胞的制备 取10ul TOP10F’菌液,接种于200ml LB液体培养基中活化培养,37℃,200 rpm,16~18小时。取100ul菌液接种于200ml液体LB
酿酒酵母感受态细胞的制备 (1)从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 ml YPD液体培养基,30℃,250 rpm 培养过夜。 (2)测定过夜培养物的OD600值为3.0~5.0之间。 (3)将10 ml YPD过夜培养物稀释至OD600值为0.2~0.4。 (4)在28~30℃摇床中继续培养3~6 hr,使其OD600值达到0.6~1.0。 (5)于室温1500 g 离心5 min 收集酵母细胞,弃上清。 (6)用10 ml 洗液洗酵母
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