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大量
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信裕生物
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10×100 μL
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文献和实验酿酒酵母感受态细胞的制备 (1)从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 ml YPD液体培养基,30℃,250 rpm 培养过夜。 (2)测定过夜培养物的OD600值为3.0~5.0之间。 (3)将10 ml YPD过夜培养物稀释至OD600值为0.2~0.4。 (4)在28~30℃摇床中继续培养3~6 hr,使其OD600值达到0.6~1.0。 (5)于室温1500 g 离心5 min 收集酵母细胞,弃上清。 (6)用10 ml 洗液洗酵母
Yeast Two-Hybrid Screening to Test for Protein–Protein Interactions in the Auditory System
We describe a protocol to screen for protein-protein interactions using the Gal-4 based yeast two-hybrid system. In this protocol, we describe serial transformation of bait into an already constructed cDNA library in yeast AH109 cells
的衍生物,不携带有些野生分离株含有的EcoRI或其它II型限制系统。 注意: 已证实,克隆实验中mcr 和mrr 位点可减少哺乳动物(8,9,11,14)和植物(9,15)甲基化序列的回收量。一般说来,从含有甲胞嘧啶有机体中克隆基因组DNA时,明智之举是使用无Mcr 和Mrr系统的菌种[如NEB 10-beta 感受态细胞(NEB #C3019)、NEB表达感受态细胞(NEB #C2523)或者T7 表达感受态细胞(NEB #C2566)]。这些有机体包括所有哺乳动物和高等植物,以及许多原核
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