5×双色Loading buffer上样缓冲液 W076

【求助】western blot 急求助

多大浓度、多少量的上样缓冲液视样品的浓度而定。 selleckchem01 就是蛋白样品加上loading buffer后加热来处理蛋白。比例是…6×buffer：蛋白样品=5：1（体积比） keathy0505 当然是要加上loading buffer再煮啊！ 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming

Annexin V 荧光双染细胞凋亡检测试剂盒实验操作指南

105重悬的细胞，300 g离心5 min，弃上清。加入500 μL稀释成1 ×的Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。 细胞悬液中加入5 μL的荧光素标记-Annexin V和5 μL的细胞核染色液。 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15~20 min。 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1 h内完成检测。 检测 1）流式细胞仪检测 处理好的样本在流式细胞仪上检测。 2）荧光显微镜分析 取一滴用荧光素-Annexin V/细胞核染色液双染的细胞

电泳迁移实验(EMSA)方法

前先混匀，并且室温（20-25℃）放置10分钟，从而消除可能发生的探针和蛋白的非特异性结合，或者让冷探针优先反应。然后加入标记好的探针，混匀，室温（20-25℃）放置20分钟。 （3） 加入1微升EMSA/Gel-Shift上样缓冲液（无色，10X），混匀后立即上样。注意：有些时候溴酚蓝会影响蛋白和DNA的结合，建 议尽量使用无色的EMSA/Gel-Shift上样缓冲液。如果对于使用无色上样缓冲液在上样时感觉到无法上样，可以在无色上样缓冲液里面添加极少量的蓝色的上样缓冲液，至能观察到蓝颜色即可