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- 百奥莱博
- MT0103-VYG
- 北京
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
293
- 英文名：
Trypsin-EDTA Solution
- 保质期：
6个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
长期保存放置于-20℃，
- 规格：
100ml
特别提示：包括胰蛋白酶-EDTA溶液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：胰蛋白酶-EDTA溶液
英文名称：Trypsin-EDTA Solution
产品货号：MT0103
产品规格：100ml
本制品含0.25%胰酶和0.02%EDTA。该消化液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的解离。本制品具有方便快速的特点，通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
使用方法：
1．贴壁细胞的消化：
① 吸去培养液，用无菌的PBS洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
② 加入少量胰酶细胞消化液，略盖过细胞即可，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
③ 显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④ 如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。
⑤ 如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2．组织的消化：不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项：
1．在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2．胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。
保存条件：长期保存放置于-20℃，保存2年，一经融化后放置于4℃保存，可放置6个月，避免反复冻融。
我公司销售的胰蛋白酶-EDTA溶液优惠促销，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验。 1）高压热修复 切片脱蜡至水。将1500ml~3000ml的0.01M枸橼酸钠缓冲溶液（pH6.0，工作液）或0.001M EDTA（pH8.0）注入不锈钢压力锅中加热至沸腾。切片置于金属架上，放入锅内，使切片位于液面以下，盖锅压阀。当压力锅开始慢慢喷气时（约加热5~6分钟后），计时1~2分钟，然后将压力锅端离热源，冷水冲至室温后，取下气阀，打开锅盖，取出切片，蒸馏水洗后，PBS洗2分钟×3，下接免疫组化染色步骤。 2）煮沸热修复 切片脱蜡至水后，放入盛有 0.01M 枸橼酸钠缓冲溶液（pH
。4. 比色：选择 490 nm 波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果。个人心得体会1. 细胞消化、接种数量：注意消化和数量，消化和数量，消化和数量（重要的事情说三遍）。从我个人的实验经验来看，这是重中之重。若消化出现问题，则会影响细胞的活性，进而影响 OD 值。对于 MDA-MB-231、MCF-7、HS-578T 等一系列容易消化的细胞，消化时胰蛋白酶中不添加 EDTA，消化时也仅需胰酶浸润数秒即可。然而，对于 SW480 等一系列难以消化的细胞，胰蛋白酶中需添加浓度为 0.25
，在0.1毫升细胞悬液中加0.1毫升0.4%的台盼兰溶液。轻轻混匀，数分钟后，用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰，因而染成蓝色细胞是死细胞。 34. 培养基中丙酮酸钠的作用是什么？ 丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。 35. 二价离子抑制胰蛋白酶活性吗？使用胰蛋白酶时加入EDTA的目的是什么？ 二价离子的确抑制胰蛋白酶活性。EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子
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