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大量
- 英文名:
Sequencing Grade Modified Trypsin
- CAS号:
9002-07-7
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海雅心生物技术有限公司
- 保存条件:
2-8℃
序列分析纯胰蛋白酶
Cat.No.:SRT0201
CAS: 9002-07-7
EC: 3.4.21.4
储存温度:2-8℃
别名:重组修饰胰蛋白酶;重组甲基化修饰胰蛋白酶;重组甲基化修饰突变胰蛋白酶
来源:重组胰蛋白酶,基因工程生产,大肠杆菌表达
蛋白序列:氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致。
1.产品简介
雅心重组胰蛋白酶是由重组大肠杆菌表达生产,氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全一致,无糜蛋白酶等杂酶污染,不含有且不需要TPCK抑制其他酶活性,活性高,酶切特异性高。胰蛋白酶容易自切产生自身自切片段影响质谱分析结果,甲基化修饰和突变保证其不自切,从而也去除了因自切而产生的假糜蛋白酶的活性。
2.产品特性
| 来源 | 重组大肠杆菌 |
| 外观 | 白色、类白色粉末 |
| 比活(单位/mg 蛋白) | ≥ 4500 USP units/mg pro. |
| 蛋白电泳 | 单一主条带 |
| 电泳(分子量) | 24.0±2.4 kDa |
| 纯度(HPLC) | ≥95% |
3.推荐使用方法
建议使用50mMHAc或1mM HCl溶解或稀释。使用时,稀释在50mM NH4HCO3 或者ph7.0-8.0的缓冲溶液中。在酶切缓冲液中建议使用1mM CaCl2,重组胰蛋白酶:目的蛋白=1:20-1:100,最适PH为7.0-8.0。
4.储存和运输稳定性
储存稳定性:重组胰蛋白酶冻干粉存于2-8℃,24个月稳定;使用50mMHAc或1mM HCl溶解后储存于-20℃,反复冻融5次,无活性损失。
运输稳定性:蓝冰保温运输,活性稳定。
5.产品优势
序列分析纯蛋白酶:特异性高,稳定性好。
无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产 品批次间无差异,质量稳定。
纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
冻干粉:易于储存和运输。
符合法规要求:生产设备和生产环境符合相关法规要求,生产过程完全遵循NSF ISO 9001:2015质量体系并符合GMP指导原则。
质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。
6.产品用途
重组胰蛋白酶具有与动物源性胰蛋白酶相同的酶学性质。可替代胰蛋白酶使用,且有很多优势,如无杂酶活性,高稳定性,不自切,高活性;在使用中,无非特异性酶切片段及自切片段出现。用于特异性的蛋白质酶解、蛋白测序、制作肽谱图、蛋白质组学研究、Z-D胶上的肽段的胰酶消化等。
7.相关产品
重组羧肽酶B;
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文献和实验样品:重组胰蛋白酶,比活 4000USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适温度的研究 将底物 BAEE(0.25 mM)分别置于 4℃、15℃、20℃、25℃、30℃、40℃、50℃、60℃ 和 70℃ 水浴中温浴 20 min,加入相同体积的 RPT 酶液测定 rPT 的活力,结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。 2. 温度稳定性的研究 取
样品:重组胰蛋白酶,比活 4500USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适 pH 的研究 准备 pH 为 3~12 的底物 BAEE(0.25 mM),分别测定 rPT 纯酶液的活性,最后结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。缓冲液成分依次为 25 mM NaAc-HAc (pH 3~6),25 mM Tris-HCl (pH 7~8),25
择它们进行 GST 标签去除时,可串联一个 HiTrap Benzamidine FF(High Sub) 预装柱,因其可以特异性结合丝氨酸蛋白酶、胰蛋白酶和类胰蛋白酶。这样仅用一步就实现酶的去除并获得纯的切割后的目标蛋白。 酶切注意事项 1. 柱上酶切前通常需要进行酶切条件的摸索:可通过一定蛋白样品预酶切以确定最佳反应条件及酶用量。对于不易酶切的蛋白,可通过增加酶量及延长反应时间提高酶切效率。 2. 酶切效率可能会由于一些物质的影响而降低,如在蛋白
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