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50T
从细胞、组织或酵母中纯化至多100 μg的总RNA
- 数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
- 即用型RNA在各种下游应用中表现良好
- 少量起始样本,RNA产量稳定
- 无需酚/ 氯仿抽提,无需氯化铯梯度离心,无氯化锂或者乙醇沉淀步骤
| 样本来源 | 起始材料 | 平均产量(µg) |
|---|---|---|
| 动物细胞 LMH HeLa COS-7 淋巴细胞(未受激) |
1 x 106 1 x 106 1 x 106 1 x 106 |
12 15 35 0.5 |
| 小鼠组织 肝 肺 脾 |
10 mg 10 mg 10 mg |
40 10 35 |
| 真菌细胞 S. cerevisiae |
1 x 107 |
25 |
RNeasy Mini Kit可从少量的样本中高效纯化总RNA。RNeasy纯化技术整合了苯酚/异硫酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA纯化技术。纯化得到高品质的RNA,并且DNA残留水平达到最低。
使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1(10 mM Tris·Cl、pH 7.5的溶液中),适用于多种下游应用,包括:
- Northern印迹、点印迹和狭缝印迹
- 终点式RT-PCR
- 定量real-time RT-PCR
- 芯片分析
- Poly A+ RNA筛选
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文献和实验(二)操作步骤 1 . 样品处理: (1)培养细胞:收获细胞 1-5×10 7 ,移入 1.5ml 离心管 中,加入 1ml Trizol ,混匀,室温静置 5min 。 (2)组织:取 50-100mg 组织(新鲜或 -70 ℃ 及液氮中保存的组织均可)置 1.5ml 离心管 中,加入 1ml Trizol 充分匀浆,室温静置5 min 。 2 .加入 0.2ml 氯仿,振荡 15s ,静置 2min 。 3 .
Materials For purifying plasmid DNA from Escherichia coli cells, the Qiagen Spin Miniprep Kit produces quite reliable results. Do not autoclave solutions containing isopropanol or MOPS; use sterile filtration if necessary.
(stored in 4℃) by vortexing repeatedly, leaving no clumps. Transfer the suspension into a round-bottom 13 ml polycarbonate tube. 4. Add 4 ml of buffer P2 (stored in Qiagen buffers box) and mix by covering with parafilm and inverting 4-6 times. Incubate
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