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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 库存:
41
- 生长状态:
良好
- 年限:
2年
- 运输方式:
常温避光
- 物种来源:
人
- 规格:
>5×105细胞数
产品使用:
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
我们推荐使用人原代前脂肪细胞培养基。
细胞特性:
1)细胞来源于手术取得的正常人脂肪组织。
2)细胞鉴定:前脂肪细胞因子-1(Pref-1)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
人原代前脂肪细胞的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
人原代前脂肪细胞详述:
前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化了的前体细胞,它的存在和作用持续于人的一生,与肥胖及Ⅱ型糖尿病都有密切的关系。近年来,人们对脂肪细胞有了更深入的认识,它不仅是单纯的能量贮存器官,还通过内分泌、旁分泌、自分泌和胞内分泌等途径,与其他神经内分泌和免疫器官形成广泛联络的神经一内分泌一免疫网络,通过各种脂肪细胞因子发挥众多的生理和病理作用。同时,脂肪组织还是多能干细胞的重要来源。因此,建立人前脂肪细胞培养体系,研究其脂肪沉积与组织发育机理,具有重要的理论与实践意义。
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文献和实验吸管反复吹打使组织块分散,然后通过孔径25μM(200目)的筛网过滤,收集滤液和未过滤的组织块。5、将滤液以600g离心5分钟弃上清,加入原代培养的基础培养基制成细胞悬液。6、将未滤过的组织按照上述过程再处理一次,将俩次获得的细胞悬液混匀计数,按照104个/cm2的密度接种于培养瓶里,于37度,5%CO2培养箱中培养。接种12-16小时基本贴壁。在增殖状态下的前脂肪细胞可以使用胰蛋白酶消化的方法传代,并且可以冻存和复苏。
,收集滤液; ⑤ 将最后得到的滤液离心(700g,7—10min)。吸弃漂浮的脂肪细胞和消化液; ⑥ 用培养液a清洗细胞,离心(700g,7min)。将细胞团制成悬液,再离心。最后,将细胞沉淀用培养液a重新制成细胞悬液。 3. 原代培养; ① 用培养液a调节细胞密度。将细胞以1.5×104个/cm2 的密度接种于培养板中; ② 24h后,用DW培养液彻底清洗细胞,除去培养物中残留的胎牛血清和未贴壁的细胞(主要为红细胞); ③ 换入培养液b,在37℃、5%CO2 培养箱中培养
甲腺原氨酸(T3 )200pmol/L; 8. 筛网:孔径为25μm的尼龙网筛。 实验方法: 1. 取材 ① 取用普通食物喂养的4周龄雄性大鼠,乙醚麻醉后断头处死; ② 在无菌条件下从附睾周围切取脂肪垫,放入培养皿中。尽量除去血管。然后用清洗液冲洗3次; 2. 分离细胞 ① 充分剪碎所取脂肪细胞。然后放入消化液中,37℃水浴中振荡消化40
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