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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
56
- 英文名：
超滤离心管 0.5ml-50KD
- CAS号：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海谷研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
0.5ml
1. 贴壁细胞的消化：
a) 吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液，盖过细胞即可，室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同，对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足，可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2. 组织的消化：
不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
实验室常见故障的处理方法：
1. 螺旋瓶盖太过紧固不易打开：
当螺旋瓶盖拧不开时，可用电吹风或小火焰烘烤瓶盖周围，使其受热膨胀，再用于布包住瓶盖用力将其旋开。
2. 清除仪器上的特殊污垢：
在回流操作或浓缩溶液时，经常会有结晶析出在液面上方的烧瓶内壁上，且附着牢固，不仅不能继续参加反应，有时还会因热稳定性差而逐渐分解变色。
| 产品名称 | 超滤离心管 0.5ml-50KD厂家 |
| 规格 | 0.5ml |
| 单位 | 个 |
超滤离心管 0.5ml-50KD厂家操作步骤：
1、 按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。
2、 涂片：取待检细菌，于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水，取菌与水混合均 匀，涂成薄层。
3、 干燥：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥。
4、 固定：手持载玻片一端，标本面朝上，在酒精灯的火焰外侧快速来回移动。
5、 初染：滴加结晶紫染色液染色，清水冲洗去染色液。
6、 媒染：滴加Gram碘液，并覆盖载玻片室温放置，水洗。
7、脱色：滴加脱色液摇动，直至流下的脱色液不出现紫色为止，立即用水冲去脱色液，终止反应。
8、 复染：滴加沙黄染色液染色，水洗。
9、 干燥。镜检：置油镜观察。 染色结果： 革兰氏阳性菌：蓝色至紫色；革兰氏阴性菌：红色。
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文献和实验问：请教各位高手：超滤离心管可以反复使用多少次？使用一次后应该如何保存？用超滤离心可以把盐分彻底清除干净吗？我用的是3.5ml的超滤离心管，加样量正好3.5ml，4000rpm，40min，冷冻干燥后还是发现有很多盐分，这是什么原因？谢谢。答：1、如果你用离心管浓缩一种蛋白，可以考虑使用，直到滤膜堵住为止。2、离心管其实是一次性耗材，如果非要反复使用，可以考虑用碱处理一下，然后放到防腐剂里面保存。3、采用离心管达到脱盐的目的，要反复的加入缓冲液或水才行。4、这些在超滤离心管的使用说明书中都
1/3~1/5的膜；透过目标物，孔径应选5-10倍的膜。 【求助】准备用millipore 的超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白，在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子，但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是Amicon Ultra 15ml规格的管子，不知道有没有谁以前做过的，有关于转速，时间给一些建议，另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理？离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失？如果要把管子重复利用，NaoH清洗后，如何在20%的乙醇中保存？是将其浸到乙醇中防于4度，还是在管子中灌入
的复杂了，更不利于后期的研究了。 第三步初步浓缩（也可省略此步）：是不是在提取干细胞上清外泌体过程中会有看不到沉淀的时候？这时心中就没了谱，下游的检测项目做的更是提心吊胆。因此，在这里给出了通过超滤方法进行浓缩处理的建议。超滤的原理就是利用一定的尺寸大小的滤膜拦住大颗粒物而放过小颗粒物的原理，在离心管中最终呈现上液和下液，我们在根据实验目的各取所需。针对细胞上清液的特点，建议可以使用 10 KD ~ 100 KD 之间的超滤管来进行样品浓缩，外泌体通常是在超滤离心管的上室中，浓缩倍数控制到 5 倍
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