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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
362
- 英文名:
Yeast protoplast preparation kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50T|100T
特别提示:包括酵母原生质体制备试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:酵母原生质体制备试剂盒
英文名称:Yeast protoplast preparation kit
产品货号:HR8195
产品规格:50T|100T
酵母原生质体制备试剂盒提供全套试剂,适用于从各种酵母样本制备原生质体。此试剂盒提供了一个系统,维持原生质体是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离原生质体,而绝少交叉污染。
本试剂盒提取的原生质体组分仍保持其生化功能,适合各种下游分析。
本试剂盒不适用冷冻酵母样本的原生质体制备。
储存条件:2-8℃保存。
有效期:一年。
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制:本试剂仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
产品更新:我公司会更新或升级产品,以优化和增强其使用性能,产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时,请参照随产品附带的说明书,不要参照网上下载的说明书,可能是不同的版本。需要zuì新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全:使用时需要合适的实验室外套,一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛,应立即用水冲洗。
试剂盒以外自备试剂耗材和仪器:
● PBS ● 吸头、离心管 ● 移液器 ●冰盒 ●离心机 ● 涡旋振荡器 ●冰箱
使用方法:
使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
1.酵母培养物,在4℃,5000g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集酵母沉淀。
2.用PBS 洗涤酵母两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3.每100μl体积酵母沉淀物中加入400μl酵母线粒体提取液A,混匀后,在30℃条件下保温15分钟。
【注】:
① 酵母数量根据实验情况调整,每次的裂解液用量并不是一定的,请根据实际情况调整。
4.5000g条件下离心5-10分钟,收集酵母沉淀。
5.用PBS缓冲液洗涤酵母一次,离心收集菌体。
6.酵母沉淀物中加入500μl酵母线粒体提取液B,混匀后,在37℃或室温条件下轻微振荡60分钟-2小时。
【注】:
① 不同酵母样品试剂B 处理时间不同,一般60分钟即可。
7.在5000g条件下离心5-10分钟,收集沉淀,弃上清。
8.沉淀用PBS缓冲液洗涤一次。
9.离心收集沉淀,即得到酵母原生质体样品。
10.将酵母原生质体样本用试剂C重悬。
【注】:
● 也可用其他适当缓冲液重悬或直接用于下游实验。
11.置冰箱备用或直接用于下游实验。
我公司销售的酵母原生质体制备试剂盒北京厂家,酵母原生质体制备试剂盒,HR8195,百奥莱博,,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验适合从动物细胞、动物组织或酵母菌中同步纯化总RNA 和基因组DNA纯化的总RNA ,适合用于Northern Blot、RT-PCR、体外翻译、Primer Extension、S1 核酸酶作图、RNase 保护测定、制备mRNA 和构建cDNA 文库等各种RNA 分子生物学实验。纯化的基因组DNA 适用于PCR、Southern Blot、RAPD、AFLP、RFLP 等分子生物学实验。一、试剂盒组成、贮存、稳定性以每次从1×107 动物细胞、100mg 动物组织或5×107 酵母菌中
试剂 1M LiCl 50% PEG3350 (氯化锂转化法只能PEG3350,不能用PEG8000,PEG3350在北京莱博生物有售,80元/100克) 2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存 注:醋酸锂对毕氏酵母无效,对酿酒酵母有效,仅氯化锂有效;PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用。 感受态毕氏酵母的制备 1. 接种
原生质体 protoplast 指被细胞膜(原生质膜)包围的原生质块(含有核),也就是去掉细胞壁的全部细胞物质。在没有细胞壁的动物细胞中细胞和原生质体不能区别。将细胞放在高渗溶液中,用细胞壁分解酶进行处理,就能制备出原生质体。作为这种分解酶,在细菌方面用溶菌酶,在酵母和霉菌方面用蜗牛的消化道液,在高等植物方面用纤维素酶。制备出的原生质体不管原来的细胞形状如何,都呈球形,如果移入低渗溶液,就会由于吸水而膨胀或破裂。但在适当的渗透压条件下,它保持细胞原有的各种活性,而且还显示出在通常
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