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- 百奥莱博
- HR8195-OXE
- 北京
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
445
- 英文名：
Yeast protoplast preparation kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50T/100T
特别提示：包括酵母原生质体制备试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：酵母原生质体制备试剂盒
英文名称：Yeast protoplast preparation kit
产品货号：酵母原生质体制备试剂盒
产品规格：50T/100T
酵母原生质体制备试剂盒提供全套试剂，适用于从各种酵母样本制备原生质体。此试剂盒提供了一个系统，维持原生质体是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离原生质体，而绝少交叉污染。
本试剂盒提取的原生质体组分仍保持其生化功能，适合各种下游分析。
本试剂盒不适用冷冻酵母样本的原生质体制备。
储存条件：2-8℃保存。
有效期：一年。
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
试剂盒以外自备试剂耗材和仪器：
● PBS ● 吸头、离心管 ● 移液器 ●冰盒 ●离心机 ● 涡旋振荡器 ●冰箱
使用方法：
使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
1．酵母培养物，在4℃，5000g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
2．用PBS 洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3．每100μl体积酵母沉淀物中加入400μl酵母线粒体提取液A，混匀后，在30℃条件下保温15分钟。
【注】：
① 酵母数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
4．5000g条件下离心5-10分钟，收集酵母沉淀。
5．用PBS缓冲液洗涤酵母一次，离心收集菌体。
6．酵母沉淀物中加入500μl酵母线粒体提取液B，混匀后，在37℃或室温条件下轻微振荡60分钟-2小时。
【注】：
① 不同酵母样品试剂B 处理时间不同，一般60分钟即可。
7．在5000g条件下离心5-10分钟，收集沉淀，弃上清。
8．沉淀用PBS缓冲液洗涤一次。
9．离心收集沉淀，即得到酵母原生质体样品。
10．将酵母原生质体样本用试剂C重悬。
【注】：
● 也可用其他适当缓冲液重悬或直接用于下游实验。
11．置冰箱备用或直接用于下游实验。
除了酵母原生质体制备试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| HR0251 | 植物线粒体提取试剂盒 | 50T/100T |
| HR8195 | 酵母原生质体制备试剂盒 | 50T/100T |
| HR8202 | 植物线粒体提取试剂盒 | 50T/100T |
| HR8203 | 植物细胞核/胞质提取试剂盒 | 50T/100T |
| HR8205 | 外泌体提取试剂盒(血清/血浆) | 50T/100T |
| HR8207 | 外泌体提取试剂盒(体液) | 50T/100T |
| HR8211 | 叶绿体核糖体提取试剂盒(非酶法) | 50T/100T |
| HR8213 | 植物线粒体核糖体提取试剂盒(非酶法) | 50T/100T |
| HR8220 | 高纯度外泌体提取试剂盒(体液) | 20T/50T |
| HR8221 | 高纯度外泌体提取试剂盒(乳汁/唾液) | 20T/50T |
| HR8223 | 高纯度外泌体快速提取试剂盒(血清/血浆) | 20T/50T |
| HR8226 | 高纯度外泌体快速提取试剂盒(乳汁/唾液) | 20T/50T |
| BTN111208 | 植物线粒体纯化试剂盒 | 5次 |
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文献和实验原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下，①具有再生细胞壁，进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有摄取外源大分子、细胞器，以及细菌，病毒的能力，因此是进行遗传操作，基因转移的好材料；③通过同种和异种植物的原生质体融合，可产生异核体，实现体细胞杂交，培育出新品种。 实验原理 去掉植物细胞壁的方法可以是机械的人工操作，也可以利用酶解法。较早利用机械法制备原生质体的首推Klercker（1892），直到1960 年英国科学家Cocking 才第一次用酶法大量制备
。（8） 溶壁酶酶液：1.5%，用0.6MMgSO4配制，过滤除菌；（9） 培养皿：根据样品个数2． 制备方法：（1） 称取离心管重量并记录；（2） 用接种针挑出菌丝，并用灭菌双蒸水冲洗一次，然后用无菌的0.6M MgSO4冲洗两次，用灭菌的滤纸吸干，放入已知重量的离心管，称重并记录；（3） 计算得到菌丝重量，按0.2（g）：1(mL)加入灭菌酶液，震荡均匀；（4） 28℃，3~4小时，摇床震荡（轻微），酶解，同时每30min镜检观察原生质体数量；（5） 灭菌注射器（含脱脂棉和玻璃钎维）过滤
实验步骤 1. 酵母DNA微量制备(40ml) 1) 在125ml三角瓶中用40ml YPD培养液在30℃条件下培养细胞达最大生长量(过夜)。 2) 将上述培养物移入螺盖离心管，用医用离心机或Sorvall SS-34转头以5000r/min离心5分钟，弃去上清液。 3) 将细胞悬浮在3ml的0.9mol/L山梨醇-0.1mol/L Na2 EDTA(pH7.5)溶液中。
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