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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
26
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
人14-3-3蛋白(14-3-3pro)ELISA试剂盒试剂盒特点
A. 分子量大。合成肽采用化学方法制备,由于工艺的局限,合成数量有限,只能达到数百个氨基酸;而利用基因工程制备的抗原,分子量更大。
B. 稳定性。包被的抗原的稳定性可使试剂盒的效期得到保证,早期以合成肽为包被抗原的试剂盒效期只3-4个月,采用基因工程抗原后效期大大延长了。
C. 基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达,表达产物包含更多的抗原决定簇,可提高试剂盒的灵敏度,提高检出率。
D. 纯化难度大。基因工程抗原的纯化技术难度较大。
人14-3-3蛋白(14-3-3pro)ELISA试剂盒操作注意事项:
1) 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2) 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3) 不用的其它试剂应包装或盖。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4) 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
5) 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6) 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
7) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
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文献和实验liteng1117 求助: 构建好了重组腺病毒进行蛋白表达,分子量是14kd,5%的浓缩胶70v,12%,或15%的分离胶110v,跑90min。湿转:100v,90min。封闭用5%的脱脂奶粉,封闭3h(因为背景深,以为封闭久会好些)。一抗1:3000,4度过夜,二抗1:5000,孵育1h,洗膜都是用TBST漂洗15min ×4次。但是显影后背景特别深,虽然可以看见目的条带,但还是有一些非特异性的条带出现,不知道是封闭出问题还是一抗浓度过高。
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