肉桂醇脱氢酶(CAD)提取液

特别提示：包括肉桂醇脱氢酶(CAD)提取液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：肉桂醇脱氢酶(CAD)提取液
产品货号：GL2502
产品规格：100ml

用途：
主要用于裂解植物组织，提取样品中的肉桂酸-4-羟基化酶

注意事项：
肉桂酸-4-羟基化酶是催化桂皮酸形成咖啡酸、香豆酸的酶。该酶多存在于高等植物、酵母、菌类可溶性部分物质，属于细胞木质素合成途径中间的关键酶，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理

储存条件：4℃，避光，12个月

除了肉桂醇脱氢酶(CAD)提取液,，我公司还供应以下相关产品：



名称：过硫*铵(粉剂)
货号：SNM397
规格：100g

名称：BCA蛋白浓度试剂盒
货号：RFT057
规格：500次
BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物，并将Cu2+还原成Cu+，而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物，并在562nm处有zuì大的光吸收值，该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。本试剂盒可以检测500个样品(使用微孔板)或50个样品(使用试管)。

试剂盒组成：

组份	包装	贮存方式
BCA试剂A	100 ml	RT
BCA试剂B	3 ml	RT
牛血清白蛋白(BSA)标准溶液(5 mg/ml)	2×1 ml	-20℃
PBS溶液	10 ml	4℃
说明书	1份

产品特点：
1、灵敏度高，检测浓度下限达到25μg/ml(在20-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系)，zuì小检测蛋白量达到0.2μg，待测样品体积为1-20μl。
2、BCA法测定蛋白浓度的zuì大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于0.01%。

储存条件：室温，有效期12个月。

名称：膜/胞浆/核蛋白分步提取试剂盒
货号：HR0007
规格：50T/100T
膜蛋白/胞浆蛋白/核蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中分步提取膜蛋白/胞浆蛋白/核蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。

储存条件：蛋白酶抑制剂-20℃保存；磷酸酶抑制剂2-8℃保存；蛋白提取液2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2．将蛋白提取的时间缩短至 30分钟-1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒
使用注意事项：
1．旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3．蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

使用方法：
蛋白提取步骤：
1．提取液制备：每 400μl冷的蛋白提取液A/B/D中加入分别加入2μl蛋白酶抑制剂混合物和2μl磷酸酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取5-10×106个细胞①，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，用细胞刮刀收集细胞。(组织样本50-100mg 剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨)，冰上静置5分钟，小心将匀浆吸入另一预冷的干净离心管。在4℃，500g条件下离心2-3分钟，弃上清。)
3．用冷 PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．每 5×106个细胞中加入400μl冷的蛋白提取液A，混匀后，在4℃条件下用试剂盒所配针筒反复吸吹细胞，使细胞完全破裂。
5.在 4℃，1000g条件下离心5分钟。
6．快速将上清(I)吸入另一预冷的干净离心管，在沉淀中加入200μl冷的提取液B，高速涡旋振荡15秒。
7．将混匀的提取液B置冰上40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。
8.在 4℃，16000×g条件下离心10分钟。将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。
9.在步骤6中所得到的上清(I)中加入5μl提取液C，充分混匀。37℃水浴10分钟。
10．37℃下② 1000g离心3分钟，此时溶液分为两层(对着光线看)，上层是胞浆蛋白部分，下层是膜蛋白部分约为40-50μl。
11．将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白。
12．用 80-200μl冰冷的提取液D 稀释步骤10中的下层部分，即得膜蛋白。
13．将上述蛋白提取物定量③后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验④。
注：
①细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
② 必需保证在37℃左右下离心，至少确保30℃以上。无可控温的离心机时，用常温的离心机在室温离心即可，适当缩短离心时间至2-3分钟。
③ 建议用BCA 法进行蛋白定量。
④蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。