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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
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25U×5
特别提示:包括Cre重组酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Cre重组酶
产品货号:JN0078
产品规格:25U×5
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。loxP识别元件是一34bp序列,其两端是两个13 bp的反向重复序列,中间是起定向作用的8 bp间隔区。重组产物根据loxP位点的位置和相对方向而不同,两个含单loxP位点的DNA将被融合。两个正向重复loxP位点间的DNA将以环状形式切割,而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转。
本制品是把编码细菌噬菌体P1 Cre蛋白的质粒在大肠杆菌中进行表达后,经多次纯化分离而得到的。
产品用途:
1、两个loxP位点之间DNA的切割;
2、含loxP位点DNA分子的融合;
3、loxP位点之间DNA序列的翻转。
使用建议:建议进行琼脂糖凝胶电泳前,将Cre重组酶反应混合物于70℃温育10分钟。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:在50 μl反应体系中,37℃ 30分钟条件下,使0.25 μg的pLox2+对照DNA产生zuì大位点特异性重 组所需要的酶量定义为一个单位。zuì大重组可以 通过琼脂糖凝胶电泳分析或通过反应物转化后行 氨苄抗性平板筛选。
热失活:70℃,10分钟。
我公司销售的Cre重组酶质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验lwjssry 求含有CRE重组酶序列的载体,有如下质粒可交换,或积分交换 表达载体: pcDNA3.1(+) pcDNA3.1/GS pcDNA4HisMax B pIRES2-EGFP pAAV-IRES-hrGFP pBudCE4.1 pEGFP-C1 pEGFP-N1 pCMV-DsRed 腺病毒载体 pADeasy-1,pShuttle,包括菌种
条件性基因敲除的基本原理 Cre / loxP 重组系统条件性基因 敲除主要是通过Cre/10xP或者Ftp/FRT重组系统来实现的。这两个系统都是位点特异性重组酶系统,已发展成为在体内、外进行遗传操作的有力工具。这两个系统的应用,可以使靶基因的表达或缺失发生在试验动物发育的某一阶段或某一特定的组织器官。此外,若与控制Cre或Flp表达的其他诱导系统相结合,还可以对某一基因同时实现时空两方面的调控。1.Cre/loxP系统的原理Cre/loxP系统来源于F1噬菌体,可以介导位点特异的DNA重组
Cell Rep:北京大学李家立课题组揭示阿尔茨海默病易激惹症状发生的神经环路机制
电位容纳能力的降低和动作电位发放的减少。 图 1. A-type PT 神经元的兴奋性增加 为了进一步验证 A-type PT 神经元的兴奋性增加与小鼠攻击行为之间的关系,作者们通过逆向示踪病毒定位、Cre 重组酶诱导,在此类神经元中表达了化学遗传受体,发现抑制此类神经元可以有效的缓解 AD 小鼠过高的攻击行为。 图 2. 抑制 A-type PT 神经元降低小鼠的攻击行为 在确定了 A-type PT 神经元在 AD 攻击行为中的重要作用后,作者们继续探究了此类神经元兴奋性增加的原因。两类
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