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- 百奥莱博
- JN0027-BQJ
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
252
- 英文名：
Fast Pfu DNA Polymerase
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
250U
特别提示：包括快速Pfu DNA聚合酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：快速Pfu DNA聚合酶
英文名称：Fast Pfu DNA Polymerase
产品货号：JN0027
产品规格：250U
Pfu DNA聚合酶为zuì常用的高保真DNA聚合酶，在需高保真的PCR反应中广范使用,然而Pfu酶扩增灵敏度不高，延伸速度缓慢（1kb/分钟）给众多的使用者带来了不便。针对普通Pfu酶的扩增缺陷， 百奥莱博采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造，制备的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点，是新一代的高保真DNA聚合酶。使用Fast Pfu能获得更理想的扩增结果，并大幅度缩短扩增反应时间。
产品组成：
| 组份 | JN0027-250U |
| Fast Pfu DNA 聚合酶（5U/μl） | 50μl |
| dNTP混合液（各10mM） | 200μl |
| 5×Fast Pfu Buffer with Mg2+ | 2ml |
产品特点：
1、高保真：具有同Pfu酶相同的保真度，为普通Taq酶的10倍。
2、快速：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍，72℃保温30秒可延伸1kb以上。
3、高效：以λDNA为模板，扩增长度可达12kb，能高效扩增≤6kb片段；对于人基因组DNA等复杂模板，能有效扩增出3kb特定基因片段。
4、高灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段（图例一）。同样条件下对于基因组DNA的扩增显著优于普通Pfu酶。
5、独特配方的5×Buffer：使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。
产品用途：用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成、DNA末端补平等。
使用建议：
Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3′端"A"突出，除使用BalbRec 一步定向无缝克隆外，其它PCR产物的克隆方案有：
1、PCR前引物进行5′端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。
2、将产物3′末端加A后再与T载体连接。
注意：由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′ 端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3′→5′ 外切酶活性引起的引物降解，尽量在冰上配制反应体系，并zuì后加入Fast Pfu酶。
应用实例：
图例一） 50μl扩增体系中，分别以50ng～0.05ng人基因组DNA为模板，可对特定基因片段（1.2kb）进行很好的扩增。
泳道1：50ng；泳道2：5ng；泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng；泳道M：DNA Ladder 2000
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
活性定义：在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入 反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
常用反应体系（50μl）
| 组分 | 体积 |
| 5×Fast Pfu Buffer* | 10μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| dNTP(各10mM) | 1.0μl |
| 模板 | 1-50ng（质粒） |
| 10ng-1μg(基因组) | |
| Fast Pfu | 0.25μl（1.25U） |
| ddH2O | 至50μl |
| *Mg2+终浓度为2mM | |
除了快速Pfu DNA聚合酶,，我公司还供应以下相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN60901 | 可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂 | 0.3mL |
| WE0159 | dNTP混合溶液(10 mM) | 1ml|5ml |
| ALH191 | 荧光定量反转录PCR试剂盒(两步法) | 50μl×25次|50μl×50次 |
| RFT162 | 10mM dNTP溶液 | 0.5ml|5×0.5ml |
| RFT163 | 2.5mM dNTP溶液 | 0.5ml|5×0.5ml |
| SY0035 | 热启动PCR Master Mix(不含染料) | 1ml×5 |
| SY0291 | 第一链cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR | 200T |
| JN0022 | 大片段Bst DNA聚合酶 | 800U |
| JN0045 | PCR优化试剂盒 | 80次 |
| QN0943 | 通用反转录试剂盒(不含Taq酶) | 50T|100T |
| HQF11 | 全血免抽提直接PCR试剂盒 | 100次/500次/1000次 |
| GL1299 | AMV/MMLV反应缓冲液(10×,pH8.3) | 10ml |
| WH0069 | Taq Plus DNA聚合酶 | 250U|500U |
| WH0082 | 超纯dNTPs混合液（10mM) | 1ml|5×1ml |
| WH0110 | 荧光定量检测试剂盒（染料法) | 125次|500次|5000次 |
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文献和实验PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应，对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么，对于 PCR 反应的核心成份，DNA 聚合酶，你选对了吗？ 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等，常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分，高保真聚合
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合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素。选择最合适的耐热聚合酶，是进行PCR实验首先要考虑的问题。许多耐热DNA聚合酶的主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。 下面是六种不同耐热聚合酶的比较： Taq：扩增效率最高的耐热DNA聚合酶，能很好的扩增6kb以下的DNA 片段。扩增碱基出错率为10-5左右。 Pfu：目前保真度最高的耐热DNA聚合酶，碱基出错率为10-6，但扩增效率低于Taq酶，一般能很好的扩增2kb以下的片段。 Taq
交叉污染。无菌移液管到使用时才能打开其包装。移液管应存放在工作区内。 试剂瓶和培养瓶使用后应盖上盖子，多孔板应用胶带密封或放入可重复密封的袋中，以防止微生物和悬浮污染物进入。 无菌培养瓶、试剂瓶和培养皿等到使用时才能打开盖子，不得将其开放暴露在环境中。使用后，应立即盖好盖子。 盖子取下后，必须开口朝下放置在工作台面上。 必须使用无菌的玻璃器皿和其他设备。 进行无菌操作时，不要交谈、唱歌或吹口哨。 尽可能快速地进行实验，以降低污染风险。 文章来源：赛默飞世尔科技
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