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轴突钙成像/Cre依赖 AAV
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6~12 个月
rAAV-EF1α-DIO-axon-GCaMP6m
枢密科技
滴度≥2.00E+12 vg/mL,5ul
病毒用途:钙离子成像技术(Calcium imaging system)属于光遗传学技术中的一类,实际检测的是细胞或组织中Ca2+的浓度变化,将钙浓度变化转化为荧光信号。且钙离子是细胞信号传导中的重要信使,从而通过荧光信号强度变化来检测神经元的活动。名称释义:rAAV: Recombinant adeno-associated virus, 重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体,安全性高(目前还没有发现rAAV对人体致病),免疫原性低(感染后很少被免疫系统所清除),表达时间长。EF1α:elongation factor 1-alpha,人类靶向延长因子,广谱性强启动子。DIO:Double-floxed inverse Orientation, 是和Cre重组酶配合控制目的基因表达的元件。如果没有Cre重组酶的话目的基因不表达,在有Cre 的情况下目的基因才能开始表达。GCaMP6m:GCaMP 蛋白,由cpEGFP 蛋白、CaM (calmodulin 钙调蛋白)、M13 肽这三个结构组成,当有钙离子存在时,CaM 和M13 结合,连带引起cpGFP 蛋白的构象,增强荧光信号。在实验中用于指示细胞中的Ca 信号活动。GCaMP6 作为新一代的GCaMP荧光蛋白,可以特异高效地反映细胞内游离Ca2+浓度的变化。它有三种常用的亚型,6s,6f 和6m,其中对于钙离子的结合力,6s>6m>6f,所以6s 最敏感,适合低频信号的指示,6f 解离最快,适合高频信号的指示,6m 结合活性适中,适用的范围最广。axon-GCaMP6:Axon-GCaMP6系统是由常规的GCaMP蛋白耦合一个驱动轴突定位的靶向元件GAP43(growth associated protein-43)构成。从而实现axon-GCaMP在树突和远端轴突中表达。因此可以检测轴突中钙离子浓度的变化。
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