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- 2026年05月16日
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SUNBIO
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80ml
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Cat No.：pSC1087
| 细胞名称 | C2C12 |
| 细胞形态图200× | |
| 组织来源 | 小鼠肌肉 |
| 细胞简介 | C2C12细胞为小鼠成肌细胞，来源于小鼠肌肉，中文名为小鼠成肌细胞，正常的细胞形态为上皮样，贴壁生长。 |
| 培养基 | DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10% |
| 培养条件 | 37℃ 5% CO2 |
| 消化条件 | 0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液，消化5-10min |
| 传代比例 | 1：3-1：6 |
| 换液时间 | 2-3天换液一次 |
| 冻存液比例 | 85%培养基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO |
| 冻存密度 | 1-3 ×10 6/管，液氮保存 |
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文献和实验1) 细胞消化液的配制及存储：我采用的是0.25%Trypsin+0.05%EDTA的消化液，BUFFER采用的是D-Hank's液。配完后分装成4-5ml/tube，于-20度冰箱中储存。2) 消化前的处理：当细胞生长至亚融和状态需要传代时，提前半小时将配好的消化液放在细胞培养孵箱中预热，同时将配好的高压无菌的D-Hank's液也进行预热。3) 消化细胞：将预热的D-Hank's液洗细胞2次，2ml/25cm2，然后再加入预热的消化液，作用3-5min，并反复振荡，镜下观察。当细胞被消化
地控制细胞分化率。 RAW264.7 细胞三天不传代更容易分化，很难吹下，每一次接种密度都要控制好；培养过程中一般无法保证 100% 不分化，分化的细胞贴壁性比未分化的要强，传代时只要容易吹下的细胞就可；吹打的力度一定要轻，切勿暴力吹打。 图 8：分化的 RAW 264.7 细胞形态 ④C2C12 细胞 C2C12 细胞是小鼠成肌细胞，属于贴壁细胞，分化很快，形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白 2(BMP-2) 诱导 C2C12 细胞，会导致 C2C12 细胞的分化途径从成肌细胞
远远比常规试剂盒提取高，更好的保留外泌体的活性和形态； 大规模提取是有参考的解决方案的，这两篇文献很好的做了阐释。 关键步骤 [1]： ● 收集条件培养基（CM）：收集神经母细胞瘤 N2a 和成肌细胞 C2C12 的培养基，经过低速离心和 0.22 μm 过滤去除大颗粒和细胞碎片。 ● 处理大体积培养基：对于大体积培养基（50 ml 至 200 mL），使用切向流过滤（TFF）系统进行浓缩和透析，然后加载到结合-洗脱分子筛层析（BE-SEC）柱上进行纯化。 ● 分离 EVs：根据 280 nm
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