
Southern Blot印迹杂交检测-DIG探针标记
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- 2025年07月15日
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Southern Blot印迹杂交检测-DIG探针标记
- 提供商:
ZoonBio
是进行基因组DNA特定序列定位的方法。其原理为利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的DIG标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。
Southern Blot服务报价
| Southern Blot服务 | ||
| 服务名称 | 服务项目 | 服务报价 |
| DIG探针标记 | 探针标记/基因 |
电话 4000251124 |
| Southern杂交检测 | 8 个样品+1 个阳性对照(1 张膜) | |
| 我们接受高质量的DNA样品,如果需要钟鼎生物提取DNA样品,请提供新鲜的细胞、组织或菌液,我们会酌量加收部分服务费用 | ||
客户提供材料
1、待杂交目标基因序列和引物序列及PCR扩增条件
2、待杂交的高质量DNA样品质量至关重要,决定实验的成败,请确保DNA抽提质量
A、DNA完整性好,客户需提供电泳图
B、DNA纯度高,客户需提供分光光度检测结果
C、勿用TE溶解DNA,DNA浓度不低于0.7ug/ul,杂交需模板DNA约20ug/泳道/次
Southern Blot实验流程
1、制备待测DNA
2、DNA限制酶消化
3、琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品
4、电泳凝胶预处理
5、转膜
6、探针标记
7、预杂交
8、Southern杂交
9、洗膜
10、放射性自显影检测
11、实验结果分析及报告
Southern Blot服务发货文件
钟鼎生物负责对客户提供样品进行DIG探针标记与Southern杂交检测技术服务,
1、DNA样品检测报告(实验样品不返还,请注意保留备份)
2、标准实验流程报告
3、实验结果检测报告
详细信息请参考
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文献和实验【交流】DIG/Biotin标记的Southern/Northern杂交专题讨论
Southern印迹杂交(Southern blot)是1975年由英国人southern创建,是研究DNA图谱的基本技术,在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。 早期的Southern印迹是将凝胶中的DNA变性后,经毛细管的虹吸作用,转移到硝酸纤维膜上。印迹方法如电转法、真空转移法;滤膜发展了尼龙膜、化学活化膜(如APT、ABM纤维素膜)等。利用Southern印迹法可进行克隆基因的酶切、图谱分析、基因组中某一基因的定性及定量分析、基因突变分析及限制性片断长度多态
Southern 杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的 DNA 样品固定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相 DNA 的位置上显示出杂交信号。通过 Southern 杂交可以判断被检测的 DNA 样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。该项技术广泛被应用在遗传病检测、DNA 指纹分析和 PCR 产物判断等研究中。但由于该技术的操作比较烦琐、费时,所以现在有一些其他的方法可以代替 Southern 杂交。但该技术也有它的独特之处,是目前其他方法
线的塑料夹层中,带有DNA的一面朝下,置于紫外透射仪(波长在254 nm)上,以合适的照射强度进行紫外线交联,以固定DNA。 (7) 用蒸馏水短暂的漂洗已交联的膜后,将其夹于2张Whatman 3 mm滤纸之间,80℃真空干烤2h或空气干燥。转印膜干燥后可夹在2张Whatman 3mm滤纸之间,室温下放置数月。备做核酸杂交实验。 Southern Blot仅仅是将待测DNA片段从电泳凝胶中转移并固定到固相支持物上,要实现DNA探测还需完成核酸杂交实验(包括探针标记、杂交和检测三个后续实验
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