细胞基因组DNA提取试剂盒(20分钟)

特别提示：包括细胞基因组DNA提取试剂盒(20分钟)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：细胞基因组DNA提取试剂盒(20分钟)
英文名称：Cell genomic DNA Extraction Kit
产品货号：MT0044
产品规格：50T

本试剂盒采用独特的裂解液，可快速可靠的从细胞样本中纯化出高纯度的DNA，zuì大限度的去除蛋白、色素、脂类等杂质污染。应用本试剂盒获取的DNA纯度高，无抑制剂，A260/A280为1.6-1.9。应用本试剂盒提取的DNA可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern杂交等多种分子生物学实验。

产品组成：

组分	规格
gDNA LB1	6ml
gDNA BB2	40ml
Washing Buffer（已含乙醇）	55ml
蛋白酶K（20mg/ml）	1ml
RnaseA（20mg/ml）	0.25ml
DNA Elution Buffer	10ml
吸附柱	50套
1.5mL Nuclease-Free收集管	50个

保存条件：室温避光保存，有效期2年。

应用实例：

应用百奥莱博20分钟细胞DNA提取试剂盒分别提取MCF7、A549、鸡胚成纤维细胞和TCA8113细胞的基因组DNA，每种细胞数量在~10⁶个， M为DNA Marker 10000。

操作方法：

1．样本处理（1.5ml EP管中处理）
  贴壁培养细胞（＜10⁶个）: 胰酶消化完毕后，离心收集细胞沉淀，用50μl 水重悬细胞沉淀，加入5μl RnaseA 和 100μl gDNA LB1 漩涡 15s，56℃水浴锅中消化 5分钟。
  悬浮培养细胞（＜10⁶个）：直接离心收集细胞沉淀，用50μl 水重悬细胞沉淀，加入5μl RNaseA 和 100μl gDNA LB1漩涡 15s，56℃水浴锅中消化 5分钟。
2．向上述准备好的样品溶液中加入20μl 蛋白酶 K 漩涡混合均匀 15s，56℃水浴锅中消化 5分钟。
3．加入700μl gDNA BB2 漩涡震荡混合均匀 1分钟，13000rpm离心3min。
4．将上清液倒入到吸附柱中，13000rpm离心1分钟。
5．倒掉废液。向吸附柱中加入500μl Washing Buffer，13000rpm离心15s。重复此步骤一次。
6．将吸附柱重新放回离心机，13000rpm空离心2分钟，将残留的乙醇彻底甩干。
7．将吸附柱芯放入到 1.5ml 收集管中，向吸附柱芯中加入60～150μl DNA Elution Buffer（DNA Elution Buffer预热到65℃将提高洗脱产量），室温放置1分钟，13000rpm离心1分钟，洗脱液即为基因组DNA，冷冻保存。

常见问题分析：

堵塞离心柱原因和解决方法：
1．样品量过大，减少细胞的用量；
2．细胞沉淀重悬不充分，导致细胞团块未能完全裂解。
3．已经发生堵塞现象，请用200μl 吸头在滤芯上，轻划几次，再进行后面离心步骤，并延长离心时间，一般不会影响 DNA产量。

我公司销售的细胞基因组DNA提取试剂盒(20分钟)质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。