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- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Phosphoglycerate Kinase(PGK) Activity Assay Kit
- 库存:
99
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号:
BC2255-100T/96S
- 规格:
100管/96样
性检测试剂盒说明书
微量法
货号:BC2255
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体120 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 液体10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
| 试剂四 | 粉剂×1支 | -20℃保存 |
| 试剂五 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
- 试剂二:临用前加入2.5 mL蒸馏水充分溶解后待用,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
- 试剂三:临用前加入1 mL 蒸馏水充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
- 试剂四:临用前加入1 mL 蒸馏水充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
- 试剂五:粉剂置于试剂瓶内棕色管中。临用前加入4 mL 蒸馏水充分溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
- 工作液的配制:按照蒸馏水:试剂一:试剂二:试剂三:试剂四:试剂五=6:10:2:1:1:4的体积比例充分混匀,现用现配。
3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的关键酶,也是生物得以生存的关键酶。广泛存在于动植物和微生物体内,具有影响DNA复制和修补及刺激病毒RNA合成等生物学功能,广泛应用于药物靶标设计。
3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP产生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脱氢酶和NADH作用下产生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,引起340nm处的吸光度下降,即反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、低温台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
- ΔA大于0.8或者A1测定小于0.9时(96孔UV板是当ΔA大于0.5或者A1测定小于0.6时),建议将粗酶液用提取液稀释后再进行测定。当ΔA小于0.01时,可以延长反应时间(10min或15min)或增加样本体积来测定。
- 空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,变化不超过0.01。
- 样本的蛋白浓度需自行测定,由于提取液中含有一定浓度的蛋白(约1mg/mL),所以测定样本蛋白浓度时需扣除提取液自身蛋白浓度。
- 取0.1g白菜加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清后再用提取液稀释4倍,之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定=1.05-0.5559=0.4941,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9966-0.9941=0.0025,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.4941-0.0025=0.4916,按样本质量计算酶活得:PGK(U/g 质量)=321.54×ΔA÷W×稀释倍数= 321.54×0.4916÷0.1×4=6322.7626 U/g 质量。
- 取0.1g小鼠肌肉加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清后再用提取液稀释20倍,之后按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算,ΔA测定管=A1测定-A2测定=0.9327-0.4518=0.4809,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9966-0.9941=0.0025,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.4809-0.0025=0.4784,按样本质量计算酶活得:PGK(U/g 质量)=321.54×ΔA÷W×稀释倍数= 321.54×0.4784÷0.1×20=30764.9472 U/g 质量。
- 取骆驼血清样本100μL按照测定步骤直接测定,用微量石英比色皿测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定= 1.0435-0.9793=0.0642,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9966-0.9941=0.0025,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0642-0.0025=0.0617,按液体体积计算酶活得:PGK(U/mL)=321.54×ΔA=321.54×0.0617=19.8390 U/mL。
BC2270/BC2275 果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(FBA)活性检测试剂盒
BC2240/BC2245 果糖-1,6-二磷酸(FDP)含量检测试剂盒
BC0530/BC0530 果糖-6磷酸激酶(PFK)活性检测试剂盒
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文献和实验| AuthorCaiyan Huang, Dequan Zhang, Zhenyu Wang, Yingxin Zhao, Christophe Blecker, Shaobo Li, Xiaochun Zheng, Li Chen | Publish_toFOOD CHEMISTRY |
| IF8.8000 | PMID37392625 |
Cell Metab:浙大吕志民团队揭示肿瘤细胞 Warburg 效应促进肿瘤免疫逃逸
: 32322062)和 CHKα(Molecular Cell,2021,PMID: 34077757)的蛋白激酶活性在肿瘤发生发展中发挥重要作用之后,发现的第六个具有蛋白激酶活性的代谢酶。这些研究改变了业界对肿瘤代谢的传统认知,为肿瘤代谢领域的研究做出了突出贡献。
此反应由3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde 3-phosphatedehydrogenase)催化3-磷酸甘油醛氧化脱氢并磷酸化生成含有1个高能磷酸键的1,3-二磷酸甘油酸,本反应脱下的氢和电子转给脱氢酶的辅酶NAD+生成NADH+H+,磷酸根来自无机磷酸。 (7)1.3-二磷酸甘油酸的高能磷酸键转移反应 在磷酸甘油酸激酶(phosphaglycerate kinase,PGK)催化下,1.3-二磷酸甘油酸生成3-磷酸甘油酸,同时其C1
疫性疾病的病理学提供重要见解。 新的药物靶点和治疗策略。一旦发现失衡,就可以开发药物来影响这些酶的活性并纠正失衡,为 医学上至今难以攻克的疾病提供新的治疗策略。例如,许多 HDAC 抑制剂正在开发中,作为对抗 癌症和炎症性疾病(如关节炎和 I 型糖尿病)的新型药物。 对于药物开发活动,根据对 writers 和 erasers 活性的影响,很容易筛选到相应的化合物。 表征组蛋白甲基化通路 一般来说,开发组蛋白甲基转移酶 (HMT) 检测试剂盒充满挑战;大多数检测试剂盒存在几个缺点,原 因出











