维生素B6（VB6）含量检测试剂盒 微量法

维生素B6（VB6）检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC2115
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
提取液	液体35 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	液体50 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂二	液体6 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂三	液体10 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂四	粉剂×1瓶	2-8℃保存
标准品	粉剂×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 提取液：内含不溶物，使用前摇匀；
2. 试剂四：临用前加入10 mL蒸馏水混匀，2-8℃保存一周，如果一次性用不完，可分装于-20℃保存待用；
3. 标准品：10mg维生素B6，临用前加入1 mL试剂一，配成10 mg/mL的标准液。

产品说明：
维生素B6（Vitamin B6）又称吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在体内以磷酸酯的形式存在，是一种水溶性维生素，肉类、全谷类、蔬菜和坚果类中含量较高。在机体中参与多种蛋白质和氨基酸的代谢，对生物体具有极其重要的作用。
VB6与4-氨基安替比林在强氧化剂作用下生成稳定的黄色化合物，在400nm有特征吸收峰。
技术指标：
最低检出限：0.0179 mg/mL
线性范围：0.03125-1 mg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：

1. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
2. 蛋白浓度较高的样本，比如动物组织、豆类种子等，若显色完成后有沉淀产生，将样本稀释后再测定，在计

算公式中乘以稀释倍数。

1. 显色完成后立即进行测定，尽量保证反应时间一致。

实验实例：

1. 称取0.1g 小鼠肌肉组织，加入0.6mL提取液，60℃浸提30min，加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，16000rpm离心10min，取上清，之后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA=A测定管-A对照管=0.129-0.087=0.042，标准曲线y=0.834x-0.0104，计算x=0.0628，按样本质量计算VB6含量得：VB6（mg/g质量）=x×V提取÷W= 0.0628×1 ÷0.1=0.628 mg/g质量。
2. 称取0.1g花生，加入0.6mL提取液，60℃浸提30min，加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，16000rpm离心10min，取上清，之后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA=A测定管-A对照管=0.256-0.159=0.097，标准曲线y=0.834x-0.0104，计算x=0.129，按样本质量计算VB6含量得：VB6（mg/g质量）=x×V提取÷W=0.129×1÷0.1=1.29 mg/g质量。

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