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脯氨酸脱氢酶(ProDH)活性检测试剂盒 微量法

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  • ¥1750
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC4165
  • 2025年07月16日
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    • 保存条件

      -20℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Proline Dehydrogenase(ProDH) Activity Assay Kit

    • 库存

      99

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC4165-100T/96S

    • 规格

      100管/96样


    脯氨酸脱氢酶(ProDH)活性检测试剂盒说明书
    微量法
    货号:BC4165
    规格:100T/96S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    提取液一 液体100 mL×1瓶 2-8℃保存
    提取液二 液体1.2 mL×1支 2-8℃保存
    试剂一 液体20 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂二 粉剂×1 2-8℃保存
    试剂三 粉剂×1 2-8℃保存
    试剂四 粉剂×1 -20℃保存
    溶液的配制:
    1. 试剂二:临用前加入2.5 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂2-8℃保存;
    2. 试剂三:临用前加入4 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂2-8℃保存;
    3. 试剂四:临用前加入5 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂可分装-20℃保存,避免反复冻融。
    4. 工作液的配制:首先将试剂三和试剂四配成溶液,临用前根据用量按照试剂一(V):试剂二(V):试剂三(V=1.6mL):0.2mL):0.15mL)的比例充分混匀。(注意:现配现用,用多少配多少)
    产品说明:
    ProDH是存在于线粒体内的催化脯氨酸降解的关键酶。降低ProDH活性对于调节渗透平衡、防止渗透胁迫对植物造成伤害、清除自由基、保护细胞结构具有重要意义。
    ProDH催化脯氨酸脱氢生成延丙 酮 酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯 酚靛酚(DCPIP),并且在600nm处具有特征吸收峰,通过600nm吸光度的下降,测定2,6-DCPIP的还原速度,代表ProDH活性。

    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
    需自备的仪器和用品:
    天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、丙 酮、匀浆器/研钵、冰、蒸馏水。
    操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
    注意事项:
    1. ΔA大于0.6时或者A3大于1.5时建议将样本上清用蒸馏水稀释后再进行测定。
    2. 控制A3在0.8以上(96孔板在0.4以上),若A3小于0.8(用96孔板数值小于0.4时),建议将样本上清用蒸馏水稀释后再进行测定。
    3. 空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,变化不超过0.02。
    实验实例:
    1. 取0.1g稗草加入1mL提取液一进行匀浆研磨,对样本进行处理,取上清稀释2倍,之后按照测定步骤操作,用微量玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A3-A4=0.8549-0.4798=0.3751ΔA空白=A1-A2=0.8941-0.8813=0.0128ΔA=ΔA测定-ΔA空白=0.3751-0.0128=0.3623,按样本质量计算酶活得
    ProDH(U/g 质量)=333.33×ΔA÷W×稀释倍数=333.33×0.3623÷0.1×2=2415.309 U/g 质量。
    1. 取0.1g兔子肾脏组织加入1mL提取液一进行匀浆研磨,对样本进行处理,取上清后按照测定步骤操作,用微量玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A3-A4=0.9369-0.6631=0.2738ΔA空白=A1-A2=0.8941-0.8813=0.0128ΔA=ΔA测定-ΔA空白=0.2738-0.0128=0.261,按样本质量计算酶活得
    ProDH(U/g 质量)=333.33×ΔA÷W=333.33×0.261÷0.1=869.99 U/g 质量。
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    图标文献和实验
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