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脯氨酸脱氢酶(ProDH)活性检测试剂盒 可见分光光度法

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  • ¥1150
  • Solarbio已认证
  • 北京
  • BC4160
  • 2025年07月14日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Ionic Bound Pectin(ISP) Content Assay Kit

    • 库存

      999

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • CAS号

      BC4160-50T/48S

    • 规格

      50管/48样

    脯氨酸脱氢酶(ProDH)活性检测试剂盒说明书
    可见分光光度法
    货号:BC4160
    规格:50T/48S
    产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
    试剂名称 规格 保存条件
    提取液一 液体60 mL×1瓶 2-8℃保存
    提取液二 液体0.6 mL×1支 2-8℃保存
    试剂一 液体40 mL×1瓶 2-8℃保存
    试剂二 粉剂×1 2-8℃保存
    试剂三 粉剂×1 2-8℃保存
    试剂四 粉剂×1 -20℃保存
    溶液的配制:
    1. 试剂二:临用前加入5 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂2-8℃保存;
    2. 试剂三:临用前加入4 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂2-8℃保存;
    3. 试剂四:临用前加入10 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂可分装-20℃保存,避免反复冻融。
    4. 工作液的配制:首先将试剂三和试剂四配成溶液,临用前根据用量按照试剂一(V):试剂二(V):试剂三(V=1.6mL):0.2mL):0.15mL)的比例充分混匀。(注意:现配现用,用多少配多少)
    产品说明:
    ProDH是存在于线粒体内的催化脯氨酸降解的关键酶。降低ProDH活性对于调节渗透平衡、防止渗透胁迫对植物造成伤害、清除自由基、保护细胞结构具有重要意义。
    ProDH催化脯氨酸脱氢生成延丙 酮酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯 酚靛酚(DCPIP),并且在600nm处具有特征吸收峰,通过600nm吸光度的下降,测定2,6-DCPIP的还原速度,代表ProDH活性。
    注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

    需自备的仪器和用品:
    天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、丙 酮、匀浆器/研钵、冰、蒸馏水。

    操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件

    注意事项:
    1ΔA大于0.6时或者A3大于1.5时建议将样本上清用蒸馏水稀释后再进行测定。
    2控制A3在0.8以上,若A3小于0.8,建议将样本上清用蒸馏水稀释后再进行测定。
    3空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,变化不超过0.02。

    实验实例:
    1. 取0.1g稗草加入1mL提取液一进行匀浆研磨,对样本进行处理,取上清稀释2倍,之后按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定=A3-A4=0.815-0.52=0.295ΔA空白=A1-A2=0.883-0.879=0.004ΔA=ΔA测定-ΔA空白=0.295-0.004=0.291,按样本质量计算酶活得ProDH(U/g 质量)=333.33×ΔA÷W×稀释倍数=333.33×0.291÷0.1×2=1939.981 U/g 质量。
    2. 取0.1g兔子肾脏组织加入1mL提取液一进行匀浆研磨,对样本进行处理,取上清后按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定=A3-A4=0.94-0.619=0.321ΔA空白=A1-A2=0.883-0.879=0.004ΔA=ΔA测定-ΔA空白=0.321-0.004=0.317,按样本质量计算酶活得ProDH(U/g 质量)=333.33×ΔA÷W =333.33×0.317÷0.1=1056.656 U/g 质量。
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    IF6.0000PMID
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