脲酶（UE）活性检测试剂盒  微量法

脲酶（UE）活性检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC4115
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
提取液	液体60 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	粉剂×1瓶	2-8℃保存
试剂二	液体10 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂三A	液体0.4 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂三B	液体1.6 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂四	液体2 mL×1瓶	2-8℃保存
标准品	液体1 mL×1支	2-8℃保存

溶液的配制：

1. 试剂一：临用前加3mL蒸馏水充分溶解；
2. 试剂三：临用前将A液倒入B液中混合，待用；
3. 标准品：1mg/mL氮标准液。用蒸馏水稀释至2μg/mL备用。

产品说明：
脲酶（UE）广泛分布于植物的种子中，也存在于动物的血液和尿液中，某些微生物也能分泌脲酶。UE能够水解尿素产生氨和碳酸，对尿素转化起关键作用。利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH₃-N来反应UE活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
ΔA测定大于0.6时，建议将反应混合液用蒸馏水稀释或者样本用蒸馏水稀释后在进行测定。

实验实例：

1. 取0.1g绿豆加入1mL提取液进行样本处理，取上清后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA= A测定管-A对照管=0.152-0.092=0.047，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.241-0.041=0.200，按样本质量计算酶活得：UE活力（U/g质量）=0.233×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.233×0.047÷0.2÷0.1=0.548 U/g质量。
2. 取0.1g肾脏加入1mL提取液进行样本处理，取上清后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA= A测定管-A对照管=0.215-0.162=0.053，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.241-0.041=0.200，按样本质量计算酶活得：UE活力（U/g质量）=0.233×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.233×0.053÷0.2÷0.1=0.6175 U/g质量。
3. 取火鸡血清20μL直接按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算计算ΔA标准=A测定管-A对照管=0.145-0.097=0.048，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.241-0.041=0.200，按液体体积计算酶活得：UE活力（U/mL）=0.233×ΔA测定÷ΔA标准=0.233×0.048÷0.2=0.0559 U/mL。

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