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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8度
- 保质期:
现询
- 英文名:
动植物组织葡萄糖含量测试盒
- 库存:
预定
- 供应商:
Solarbio
- CAS号:
BC2500
- 规格:
50管/48样
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC2500
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体10mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二 | 液体25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 液体25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
1、试剂一:1μmol/mL葡萄糖溶液;
2、混合试剂的配制:使用前将试剂二和试剂三1:1等体积混合,用多少配多少。
产品说明:
葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物,而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言,葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯一能源,而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。
葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶(Peroxidase,POD)催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505 nm 有特征吸收峰。
技术指标:
最低检出限:0.01 μmol/mL
线性范围:0.015-3 μmol/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、超声破碎仪、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1. 组织的处理:按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL蒸馏水),研磨成匀浆,置沸水浴中煮沸10 min(盖紧,防止水分散失),冷却至室温后,8000g,25℃离心10min,取上清液备用。
2. 细菌或细胞处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL)为500~1000:1 的比例(建议500 万细菌或细胞加入1mL 蒸馏水),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率200W,超声3 s,间隔10 s,重复30次),置沸水浴中煮沸10min(盖紧,防止水分散失),冷却至室温后,8000g,25℃离心10min,取上清液备用。
二、测定步骤
- 分光光度计预热30min以上,调节波长至505nm,蒸馏水调零。
- 样本测定(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂):
| 试剂(μL) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| 上清液 | - | - | 100 |
| 试剂一 | - | 100 | - |
| 蒸馏水 | 100 | - | - |
| 混合试剂 | 900 | 900 | 900 |
三、葡萄糖含量计算
- 按蛋白浓度计算
- 按样本质量计算
- 按细菌或细胞数量计算
C:葡萄糖溶液浓度,1µmol/mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;V样:加入的样本体积,100µL=0.1mL;V样总:样本总体积,1mL;W:样本质量,g;5:细菌或细胞数量(以106计),5×106个。
注意事项:
若(A测定-A空白)小于0.005,建议加大提取样本质量(或细胞数量)或者样本上清液的加入量;(A测定-A空白)大于1.5,将上清液用蒸馏水稀释即可。计算公式中注意乘以稀释倍数。
实验实例:
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- 取0.1g小鼠肝脏加入1mL蒸馏水进行前处理步骤,离心取上清;再用蒸馏水稀释2倍后按测定步骤测定,用玻璃比色皿得吸光值ΔA测定=A测定-A空白=0.758-0.006=0.752,ΔA标准=A标准-A空白=0.600-0.006=0.594。按样本质量计算
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- 取0.1g绿萝叶片加入1mL蒸馏水进行前处理步骤,离心取上清后按测定步骤测定,用玻璃比色皿测得吸光值ΔA测定=A测定-A空白=0.539-0.006=0.533,ΔA标准=A标准-A空白=0.600-0.006=0.594。按样本质量计算
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- 取5百万Jurkat细胞样本加入1mL蒸馏水进行前处理步骤,离心取上清后按测定步骤测定,用玻璃比色皿测得吸光值ΔA测定=A测定-A空白=0.018-0.006=0.012,ΔA标准=A标准-A空白=0.600-0.006=0.594。按细胞数量计算
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葡萄糖含量(μmol/106 cell) = 0.2×ΔA测定÷ΔA标准=0.2×0.012÷0.594=4.040×10-3 μmol/106 cell
相关发表文献:
[1] Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou,et al. Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion. Cell Death and Disease. March 2019; (IF5.959)
[2] Jing Li,Yabing Duan,Chuanhong Bian,et al. Effects of validamycin in controlling Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum: Inhibition of DON biosynthesis and induction of host resistance. Pesticide Biochemistry and Physiology. January 2019; 153:152-160. (IF2.87)
参考文献:
[1] Basagni U, Bonicolini F. Ready to use liquid reagent for determining the glucose content in blood: U.S. Patent 5,077,199[P]. 1991-12-31.
[2] Kabasakalian P, Kalliney S, Westcott A. Enzymatic blood glucose determination by colorimetry of N, N-diethylaniline-4-aminoantipyrine[J]. Clinical chemistry, 1974, 20(5): 606-607.
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液。在提取内源核酸酶含量丰富的材料的DNA时,可增加裂解液中螯合剂的含量,细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔。所有试剂用无菌水配制,耗材经高温灭菌。将DNA分装保存于缓冲液中,避免反复冻融。 (2)DNA降解,DNA提取常见问题。实验材料不佳或量少,破壁或裂解不充分,吸附或沉淀不完全,洗涤时DNA丢失。尽量选用新鲜(幼嫩)的材料,动植物要匀浆研磨充分;G+菌,酵母裂解前先用 生物 酶或机械方式破壁。高温裂解时,时间适当延长(对于动物细胞,细菌可增加PK的用量)。增加吸附的时间
,低温保存材料避免反复冻融,液氮研磨或匀浆组织后,应在解冻前加入裂解缓冲液。在提取内源核酸酶含量丰富的材料的DNA时,可增加裂解液中螯合剂的含量,细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔。所有试剂用无菌水配制,耗材经高温灭菌。将DNA分装保存于缓冲液中,避免反复冻融。 (2)DNA降解,DNA提取常见问题。实验材料不佳或量少,破壁或裂解不充分,吸附或沉淀不完全,洗涤时DNA丢失。尽量选用新鲜(幼嫩)的材料,动植物要匀浆研磨充分;G+菌,酵母裂解前先用生物酶或机械方式破壁。高温裂解时,时间适当













答:您好,血清血浆样本可以选择BC2490或者BC2495,该剂盒本身没有物种特异性。
答:您好,生化试剂盒没有种属限制,可以检测动植物组织中的葡萄糖含量
答:您好,试剂盒是测定一些生物样本酶活的,材料类我们没有去测过了